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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Hieff NGS® Single Cell/Low Input RNA Library Prep Kit (1-1000个细胞全长建库试剂盒)
- 保存条件:
-25~-15℃保存。
- 规格:
8 T(12502ES08)/24 T(12502ES24)/96 T(12502ES96)
| 规格: | 8 T(12502ES08) | 产品价格: | ¥1445 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 24 T(12502ES24) | 产品价格: | ¥3460 |
| 规格: | 96 T(12502ES96) | 产品价格: | ¥12292 |
产品描述:
本试剂盒含1-1000个细胞样本的逆转录试剂以及后续的建库试剂盒,试剂盒为酶切法DNA建库试剂盒。产品更高,能保留RNA样本的5’和3’UTR区域。但是相对而言,会增加TSO以及polyA尾的序列,影响有效数据量。
Hieff NGS® Single Cell/Low Input RNA Library Prep Kit是兼容Illumina®和MGI®双平台,可以对1~1000个细胞或者10 pg~10 ng的总RNA进行测序文库构建的试剂盒。本试剂盒是以Oligo (dT) Primer为引物,利用逆转录酶的末端转移酶活性即Template-switching活性在cDNA的3’端添加接头序列,PCR扩增以这个接头序列进行全长cDNA的合成,完成全长cDNA的富集,然后对获得的全长cDNA扩增产物进行酶切法文库构建,与传统的建库方法比较,本品采用高质量的片段化酶,同时简化操作流程,将片段化模块与末端修复模块合二为一,极大的降低了建库的时间和成本,来进行基因表达差异、可变剪接、融合基因等遗传调控信息分析。
产品特色:
- 样本投入量范围广:适用1-1000个细胞投入量或者10 pg-10 ng total RNA建库。
- 细胞投入建库,操作简单:直接投入细胞建库,无需核酸提取步骤。
- 兼容96孔板/384孔板细胞样本:样本可通过显微切割获取或者直接孔板细胞培养获取。
- 逆转录后,一链cDNA为DNA/RNA杂合链。
- 含除样本外的全套建库试剂:试剂盒含全长cDNA扩增以及后续酶切DNA建库试剂盒。
应用案例:
1. cDNA扩增产物检测
使用2100Agilent 2100 Bioanalyzer的High Sensitivity DNA Chip检测取1ul纯化后的cDNA扩增产物,1个293 T 细胞和10pg的293 Total RNA,同时扩增18个循环后,峰图分析如图,NTC是无模板阴性对照。
图 cDNA扩增产物检测
2. 测序数据分析
储存条件:
-25~-15℃保存。
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文献和实验Native Chromatin Preparation and Illumina/Solexa Library Construction
Antibody and preimmune serum for ChIP CD4+ T cell Isolation Kit II (human) (Miltenyi Biotec) Alternatively, Dynabeads Untouched Human CD4 T Cells Kit (Invitrogen) can be used (see Steps 5-21). DNA End-Repair Kit (Epicentre Biotechnologies
the anti-Flag-M2 beads. Response: This has been changed accordingly and the saved input is now in step 14 of Part-II. 5.For preparation of genomic DNA by Qiagen DNeasy kit, guanidine hydrochloride would be used at the lysis step. Can DNA (or RNA)-siRNA
cDNA Library Construction from Single Cells
of molecules activated by a cellular program or by a particular physiological or pharmacological treatment. This unit presents a protocol for studying these molecules at the level of a single cell.
技术资料暂无技术资料 索取技术资料





