VAHTS Universal V8 RNA-seq Lib

VAHTS Universal V8 RNA-seq Library Prep Kit for MGI

快速、高检出的华大平台RNA建库试剂盒

RNA文库构建；基因表达分析；单核苷酸变异分析；可变剪切分析；融合基因检测；目标转录组分析

快速：简单的操作流程，使得转录组建库时间缩短至4.5 h

兼容：针对低质量样本，有更高的建库成功率

高质：基因检出率高，转录本区域的覆盖度均一

1. 不同物种、不同起始量模板

以动物（人体血液、293 T细胞），细菌（大肠杆菌），植物（拟南芥、大豆）Total RNA为模板，根据物种的不同分别选择N406（动物rRNA去除产品），N407（细菌rRNA去除产品），N408（rRNA及珠蛋白mRNA去除产品）和N409（植物rRNA去除产品）进行rRNA去除。随后参照NRM605和A公司同类型产品的建库流程进行链特异性转录组文库构建，结果显示使用Vazyme # NRM605建库相较竞品均具有明显的产量优势。

图1. 不同物种和投入量下NRM605构建的文库产量

图2. 不同物种在不同投入量下构建的文库峰型

2. 兼容低质量样本

      以低质量FFPE样本(RIN值为2.3)为起始模板，投入量为200 ng，使用VAHTS Ribo-off rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat)（Vazyme，# N406）进行rRNA去除，再分别以NRM605、A、B的建库全组分按照各自的说明书进行操作，进行链特异转录组建库。结果显示：从产量上看，Vazyme #NRM605＞A＞B，Vazyme #NRM605 具有明显的产量优势。

图3. 在不同公司产品对低质量样本建库的文库产量

3. 基因检出率高

       以293T细胞 Total RNA为起始模板，分别使用VAHTS mRNA Capture Beads（Vazyme # N401，mRNA抓取模块，Input RNA量分别为1μg/100ng/10ng）和Ribo-off rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat)（Vazyme # N406，rRNA去除模块，Input RNA量分别为1 μg/100 ng/10 ng）进行前处理，随后使用NRM605、A公司及B公司同类产品进行链特异性转录组文库构建，经质控合格后的文库使用lllumina HiSeq X10平台进行PE150测序。对原始测序数据进行低质量读过滤，得到高质量的Clean Reads进行分析。结果显示：Vazyme #NRM605基因检出率优于其他产品。

图4. 各公司产品基因检测数

VAHTS Universal V8 RNA-seq Library Prep Kit for MGI是针对MGI高通量测序平台定向开发的转录组文库构建专用试剂盒。试剂盒包含两种类型的cDNA二链合成Buffer，可根据需要选择普通转录组或链特异转录组建库。

试剂盒将二链合成、末端修复和dA-Tailing合并为一步，中间不需要纯化步骤，简化了操作流程，缩短了建库时间。优化的反应体系，提高了文库转化效率，能兼容更低起始投入量，对不同起始量的RNA都有均一的覆盖度。

本试剂盒利用磁珠分选的方式，可以快速获得特定长度的文库，能够满足不同实验的个性化需求。试剂盒包含的所有酶和缓冲液都经过了严格的质量控制和功能验证，较大程度上保证了文库构建的稳定性重复性。