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CCK8实验技术服务

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      信帆生物

    • 服务名称

      CCK8实验技术服务

    • 规格

    CCK8实验技术服务

    CCK8 是一种用于‌检测细胞增殖和细胞毒性‌的常用方法,核心原理是利用试剂中的 WST-8 成分,在活细胞脱氢酶作用下生成水溶性黄色甲臜,颜色深浅与活细胞数量成正比,通过酶标仪测定 450nm 波长的吸光度(OD 值)来反映细胞活性 。

    实验步骤(仅供参考)‌‌‌

    1细胞消化计数,接种至 96 孔板,设置空白组、对照组、不同药物浓度组,每组设置复孔。

    2细胞培养至合适汇合度,加入梯度浓度药物,孵育指定时间。

    3每孔加入 CCK8 工作液,避光孵育 1~4 h

    4酶标仪读取 450 nm OD 值。

    5计算细胞存活率,绘制浓度效应曲线。

    结果判读:

    1存活率>80%:药物无明显细胞毒性,可用于后续功能实验

    2存活率50%:对应浓度为 IC50(半数抑制浓度)

    3存活率明显下降:药物存在细胞毒性

    注意事项:

    1CCK8 避光保存,加样避免产生气泡,气泡影响读数。

    2设置溶剂对照组,保证各组溶剂终浓度保持一致。

    396 孔板边缘孔易液体蒸发,可用 PBS 填充边缘孔减少误差。

    4每组设置3 个复孔,实验独立重复至少 2 次。

    4仅能反映活细胞数量,无法区分增殖抑制与细胞凋亡。

     

     

     

     

     

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