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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
信帆生物
- 服务名称:
CCK8实验技术服务
- 规格:
个
CCK8实验技术服务
CCK8 是一种用于检测细胞增殖和细胞毒性的常用方法,核心原理是利用试剂中的 WST-8 成分,在活细胞脱氢酶作用下生成水溶性黄色甲臜,颜色深浅与活细胞数量成正比,通过酶标仪测定 450nm 波长的吸光度(OD 值)来反映细胞活性 。
实验步骤(仅供参考)
1、细胞消化计数,接种至 96 孔板,设置空白组、对照组、不同药物浓度组,每组设置复孔。
2、细胞培养至合适汇合度,加入梯度浓度药物,孵育指定时间。
3、每孔加入 CCK8 工作液,避光孵育 1~4 h。
4、酶标仪读取 450 nm OD 值。
5、计算细胞存活率,绘制浓度效应曲线。
结果判读:
1、存活率>80%:药物无明显细胞毒性,可用于后续功能实验
2、存活率≈50%:对应浓度为 IC50(半数抑制浓度)
3、存活率明显下降:药物存在细胞毒性
注意事项:
1、CCK8 避光保存,加样避免产生气泡,气泡影响读数。
2、设置溶剂对照组,保证各组溶剂终浓度保持一致。
3、96 孔板边缘孔易液体蒸发,可用 PBS 填充边缘孔减少误差。
4、每组设置≥3 个复孔,实验独立重复至少 2 次。
4、仅能反映活细胞数量,无法区分增殖抑制与细胞凋亡。
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文献和实验CCK8实验技术服务
写在前面: 一直都像个新手,从未老道过。所有新手的迷茫与无奈我最能体会。看到园子里有一些同学在问有关CCK8试验的事情,当初我也和他们一样,像个被蜘蛛丝缠住头的迷茫苍蝇一头扎进园子里,期待能找到些解决谜团的只言片语。希望我写的这些非专业文字能够帮助那些在实验室里没有前行者指点迷津的筒子们。当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,仅供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自娱自乐使劲折腾。 我没有做过MTT实验,但其实原理及目的都是
一直都像个新手,从未老道过。所有新手的迷茫与无奈我最能体会。看到园子里有一些同学在问有关CCK8试验的事情,当初我也和他们一样,像个被蜘蛛丝缠住头的迷茫苍蝇一头扎进园子里,期待能找到些解决谜团的只言片语。希望我写的这些非专业文字能够帮助那些在实验室里没有前行者指点迷津的筒子们。当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,仅供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自娱自乐使劲折腾。 我没有做过MTT实验,但其实原理及目的都是一样的(反应
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体
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