艾博抗Abcam NMNAT1活性检测试剂盒（比色法） 货号

NMNAT1活性检测试剂盒（比色法）（ab221820）提供了一种灵敏而稳健的方法，可使用重组NMNAT蛋白或纯化的NMNAT蛋白来评估烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶(NMNAT)活性的激活剂和抑制剂。

• 货号：ab221820
• 中文名称：NMNAT1活性检测试剂盒（比色法）
• 英文名称：NMNAT1 Activity Assay Kit (Colorimetric)
• 规格：100Tests
• 品牌：艾博抗Abcam
• 产地：美国/英国/中国杭州
• 货期：热销品现货，其他请咨询
• 资质：Abcam一级代理商
• 产品详情：NMNAT1活性检测试剂盒（比色法）（ab221820）提供了一种灵敏且稳定的方法来评估烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶（NMNAT）活性的激活剂和抑制剂，该方法使用重组NMNAT蛋白。该检测方法也可用于测定从细胞提取物中免疫沉淀的内源性NMNAT的活性。该检测方法基于多步反应，将WST-1转化为WST-1甲臜，后者可在450 nm处轻松检测。由于反应不会终止，因此需要在反应开始后定期监测450 nm处WST-1甲臜的吸光度变化，以确定反应速率。NMNAT活性的检测可采用一步法或两步法。一步法是将反应中涉及的四种酶混合在一起。由于三个偶联反应同时发生，因此该方法的检测灵敏度低于两步法。我们建议仅在使用纯化蛋白时进行一步法检测。两步法的操作步骤为：首先加入两种酶以生成NAD+，然后加入剩余组分，通过NAD/NADH酶循环反应生成WST-1甲臜。如果使用免疫沉淀的细胞裂解液，我们建议进行两步法检测，因为该检测方法可以检查样品中是否存在NAD+污染和干扰。由于该检测方法基于NAD+检测系统，因此无法直接检测粗细胞提取物（其中NAD+含量相对较高）中的NMNAT活性。对于一步法，我们描述了使用纯化酶检测NMNAT活性的步骤，以及筛选NAMPT活性抑制剂的单独步骤。对于两步法，我们描述了两种不同的NMNAT活性检测步骤，分别使用纯化酶和免疫沉淀的细胞裂解液进行检测。此外，我们还提供了一种筛选NMNAT活性抑制剂的单独步骤。烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶1 (NMNAT1，EC 2.7.7.1)是NAD+生物合成中的关键酶，它将ATP的腺苷酰部分转移至β-烟酰胺单核苷酸(NMN)或烟酸单核苷酸(NaMN)，从而生成NAD+或NaAD，并释放焦磷酸盐。由于该酶在肿瘤细胞中的活性较低，因此可能成为潜在的治疗靶点。研究表明，NMNAT1可抑制重组人聚(ADP-核糖)聚合酶-1 (PARP-1)约35%的活性，并完全阻止支链ADP-核糖聚合物的形成。
• 中文别名：NMNAT、NMNAT1、烟酰胺/烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶1、NMN/NaMN腺苷酰转移酶1、烟酰胺核苷酸腺苷酰转移酶1、烟酸核苷酸腺苷酰转移酶1、NMN腺苷酰转移酶1、NaMN腺苷酰转移酶1
• 英文别名：NMNAT, NMNAT1, Nicotinamide/nicotinic acid mononucleotide adenylyltransferase 1, NMN/NaMN adenylyltransferase 1, Nicotinamide-nucleotide adenylyltransferase 1, Nicotinate-nucleotide adenylyltransferase 1, NMN adenylyltransferase 1, NaMN adenylyltransferase 1
• 详细参数：检测方法：比色法；样品类型：纯化蛋白、重组蛋白；结果类型：半定量分析；平台：微孔板读数仪；
• 成分和储存条件：运输条件：干冰；适宜短期储存条件：-80°C；适宜长期储存条件：-80°C；储存信息：-80°C
• 靶点概况：催化烟酰胺单核苷酸(NMN)和ATP生成NAD(+) (PubMed：17402747)。也能以相同的效率使用脱酰胺形式的烟酸单核苷酸(NaMN)作为底物(PubMed：17402747)。也能使用三唑呋喃单磷酸(TrMP)作为底物(PubMed：17402747)。此外，还能催化逆反应，即NAD(+)的焦磷酸解裂解(PubMed：17402747)。对于焦磷酸解活性，它更倾向于以NAD(+)和NaAD为底物，而对NADH、烟酸腺嘌呤二核苷酸磷酸（NHD）和烟酰胺鸟嘌呤二核苷酸（NGD）的降解效率较低（PubMed：17402747）。它与PARP1、PARG和NUDT5共同参与细胞核内ATP的合成（PubMed：27257257）。核内ATP的生成对于耗能的染色质重塑等广泛的染色质重塑过程至关重要（PubMed：27257257）。此外，它还作为谷氨酸和天冬氨酸ADP核糖基化的辅助因子，通过引导PARP1的催化活性作用于组蛋白上的谷氨酸和天冬氨酸残基（基于相似性）。无法裂解磷酸化二核苷酸NADP(+)、NADPH和NaADP(+)（PubMed：17402747）。可保护神经免受机械或毒性损伤引起的轴突变性（基于相似性）。神经保护作用与细胞内NAD(+)水平无关，但可能仍需要酶活性（基于相似性）。

说明：所有内容为机器翻译，仅供参考，产品具体信息以Abcam厂家说明为准。