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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见包装
- 保质期:
12个月或见包装
- 英文名:
Abcam Recombinant Human eIF4B protein (GST tag N-Terminus)
- 库存:
999
- 供应商:
北京泽平
- CAS号:
不适用
- 规格:
10μg
重组人eIF4B蛋白(GST标签N端)是一种人全长蛋白,氨基酸范围为1至611,在小麦胚芽中表达,适用于SDS-PAGE、ELISA、WB。
- 货号:ab114511
- 中文名称:重组人eIF4B蛋白(GST标签N端)
- 英文名称:Recombinant Human eIF4B protein (GST tag N-Terminus)
- 规格:10μg
- 品牌:艾博抗Abcam
- 产地:美国/英国/中国杭州
- 货期:热销品现货,其他请咨询
- 资质:Abcam一级代理商
- 中文别名:真核翻译起始因子4B,eIF-4B,EIF4B
- 英文别名:Eukaryotic translation initiation factor 4B, eIF-4B, EIF4B
- 详细参数:表达系统小麦胚芽标签GST标签N端应用WB、SDS-PAGE、ELISA生物活性:否登录号P23588不含动物源性成分:否不含载体:否物种:人储存缓冲液pH:8成分:0.79% Tris-HCl,0.3%谷胱甘肽
- 成分和储存条件:运输条件:干冰;适宜短期储存条件:-80°C;适宜长期储存条件:-80°C;分装信息:到货时分装;储存信息:避免反复冻融
- 重组蛋白序列概况:登录号P23588蛋白质长度全长预测分子量93.28 kDa氨基酸1至6 11天然重组表达系统小麦胚芽标签GST标签N端
- 重组蛋白真实序列:M A A S A K K K N K K G K T I S L T D F L A E D G G T G G G S T Y V S K P V S W A D E T D D L E G D V S T T W H S N D D D V Y R A P P I D R S I L P T A P R A A R E P N I D R S R L P K S P P Y T A F L G N L P Y D V T E E S I K E F F R G L N I S A V R L P R E P S N P E R L K G F G Y A E F E D L D S L L S A L S L N E E S L G N R R I R V D V A D Q A Q D K D R D D R S F G R D R N R D S D K T D T D W R A R P A T D S F D D Y P P R R G D D S F G D K Y R D R Y D S D R Y R D G Y R D G Y R D G P C R D M D R Y G G R D R Y D D R G S R D Y D R G Y D S R I G S G R R A F G S G Y R R D D D Y R G G G D R Y E D R Y D R R D D R S W S S R D D Y S R D D Y R R D D R G P P Q R P K L N L K P R S T P K E D D S S A S T S Q S T R A A S I F G G A K P V D T A A R E R E V E E R L Q K E Q E K L Q R Q L D E P K L E R R P R E R H P S W R S E E T Q E R E R S R T G S E S S Q T G T S T T S S R N A R R R E S E K S L E N E T L N K E E D C H S P T S K P P K P D Q P L K V M P A P P P K E N A W V K R S S N P P A R S Q S S D T E Q Q S P T S G G G K V A P A Q P S E E G P G R K D E N K V D G M N A P K G Q T G N S S R G P G D G G N R D H W K E S D R K D G K K D Q D S R S A P E P K K P E E N P A S K F S S A S K Y A A L S V D G E D E N E G E D Y A E
- 靶点概况:是mRNA与核糖体结合所必需的。与EIF4-F和EIF4-A紧密结合发挥作用。在EIF-4F和ATP存在的情况下,结合于mRNA 5'末端帽附近。促进EIF4-A和EIF4-F的ATPase活性和ATP依赖性RNA解旋活性。
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文献和实验后继的亲和纯化。目前最为流行的融合标签自然是 His-Tag,和 GST,来自 G-Biosciences 等公司都有质量非常稳定可靠的产品,种类还特别丰富,分别对应不同的上样量和工作压力和流速的需要。笔者在这里介绍一下江湖中盛传的 Tag 蛋白纯化的「刀剑笑」,目的就是为在产品选择上帮你省点事...... 「横刀」-蛋白亲和纯化 GST 树脂 G-Biosciences 的谷胱甘肽树脂,用于分离 GST 重组蛋白 用来亲和纯化带有 GST 标签的蛋白。树脂由还原性的谷胱甘肽通过 10
。加入过量的螯合剂(EGTA)螯合Ca2+,使纯化的复合物与层析柱分离。 TAP 纯化时存在蛋白污染问题,很难判断这些蛋白是真正的相互作用,还是蛋白处理过程中的副产品。为此,有人建议用三标签的方法[19],但实验表明该法也不能排除蛋白的污染。其他标签也有应用,比较流行的是Flag[20]。GST、His6、生物素等也分别用于蛋白纯化,但由于他们有限的亲和力及较高的背景,在大规模的蛋白质相互作用研究中未得到广泛应用。选择何种标签也许是个难题,每种标签都有自身的弱点:大标签适于规模较大的相互作用研究
功能分析才能验证是否复性。GST融合蛋白可以免疫动物,但抗体纯化须用GSH-sepharose 4B 和蛋白A或G进一步纯化,去掉抗GST抗体,如果你的目的蛋白很大,可以凝血酶切割除去 GST,再免疫动物.GSH,Tris 是小 分子,没影响。 5) 既然目的蛋白没有活性,何来得活性鉴定,复性是否成功,就主要是看是否恢复到原来特有的三级结构,这就要看你目的蛋白的特异性,和天然的目的蛋白片断进行比较,看其复性是否彻底,这必须有个对照,才能知道复性是否完全。不知道你得到目的蛋白有什么用处,如果是用来做抗原
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