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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SKOV3细胞ATAD3C基因过表达细胞株
- 库存:
10000
- 供应商:
上海淳麦
- 组织来源:
卵巢腺癌,腹水转移
- 物种来源:
人
- 器官来源:
卵巢腺癌,腹水转移
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25/冻存管
一、产品概述
SKOV3细胞ATAD3C基因过表达细胞株 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 ATAD3C 基因过表达稳转细胞株,宿主/载体细胞为 SKOV3。该产品基于 "ATAD3C 功能研究" 需求定向构建,即购即用,可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期(常规自建需 2-4 个月)。
二、产品名称与长尾关键词
核心检索词:ATAD3C 基因过表达细胞株、ATAD3C overexpression cell line、SKOV3 ATAD3C OE、ATAD3C 稳转细胞、CRISPR ATAD3C 基因过表达、ATAD3C 功能研究模型。
三、核心参数
| 产品名称 | SKOV3细胞ATAD3C基因过表达细胞株 |
| 商品货号 | SHA-OE-1723 |
| 品牌 | 上海淳麦 |
| 细胞规格 | T25/冻存管 |
| 种属来源 | 人 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 组织来源 | 卵巢腺癌,腹水转移 |
| 器官来源 | 卵巢腺癌,腹水转移 |
| 宿主/载体细胞 | SKOV3 |
| 产地 | 上海 |
| 供应商 | 上海淳麦生物科技有限公司 |
四、产品特点
- ATAD3C 靶向基因过表达,构建与鉴定围绕该基因位点展开
- 以 SKOV3 为宿主背景(人卵巢癌),便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
- 组织来源 卵巢腺癌,腹水转移,适配相应组织背景的功能与机制研究
- 冻存管规格发货,复苏后即可进入实验,便于批次管理与保种
- 稳定整合于基因组,避免瞬时转染的表达衰减问题
- 可作为蛋白表达与病毒包装的 production 平台
- 适用于基因功能、互作与信号通路研究中的过表达模型
五、适用范围
本 ATAD3C 基因过表达稳转细胞株主要用于 ATAD3C 基因功能获得(gain-of-function)研究,通过稳定上调 ATAD3C 表达解析其蛋白功能、互作网络与下游信号;适用于重组蛋白表达、病毒包装、细胞模型构建与药物敏感性评价等。宿主细胞 SKOV3(人卵巢癌) 适用于相应组织来源相关研究。
六、构建与验证原理
ATAD3C 稳定过表达模型(货号 SHA-OE-1723)通过慢病毒介导的基因组整合实现:重组载体携带 ATAD3C 编码序列与筛选标记,感染 SKOV3 细胞后经药筛富集阳性克隆并单克隆化。阳性株以 qPCR(mRNA 水平)与 Western blot(蛋白水平)验证 ATAD3C 上调幅度,确保后续功能实验的表达基础可靠。
七、细胞培养方案建议
1. 复苏:冻存管自液氮取出后立即置 37℃ 水浴快速解冻(约 1–2 分钟,至仅余少量冰晶),75% 酒精擦拭管口,将悬液转入含预温完全培养基的离心管,100×g 离心 5 分钟去除冻存保护剂(DMSO),弃上清后重悬并接种于 T25 培养瓶(SKOV3 建议 1–3×10⁵ cells/cm²),置 37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。
2. 培养条件:培养基以 10% FBS 完全培养基为主,可视需要加入双抗防止污染;SKOV3 常规每 2–3 天换液,换液前后观察培养基颜色与 pH 变化,及时剔除异常孔/瓶。
3. 传代:贴壁细胞传代采用胰蛋白酶消化:弃培养液,PBS 轻洗 1–2 次,加入 0.25% Trypsin-EDTA,37℃ 孵育 1–3 分钟(镜下见细胞变圆、间隙增大即终止),加入含 10% FBS 的完全培养基终止消化并吹打脱壁,100×g 离心 5 分钟收集细胞,按 1:3–1:6 接种于新培养瓶。消化时间因细胞系而异,避免过度消化。
4. 倍增与接种:多数肿瘤细胞系群体倍增时间约 18–36 小时、正常细胞系约 24–48 小时(以具体细胞系特性为准);建议汇合度达 80–90% 时传代,避免过度汇合导致分化或凋亡。
5. 冻存:冻存取对数期细胞,冻存液推荐 90% FBS + 10% DMSO 或商业无血清冻存液,细胞密度 1–3×10⁶ cells/mL,程序降温盒 -80℃ 阶梯降温过夜后转入液氮长期保存,避免 4℃ 以上长时间停留造成冰晶损伤。
6. 状态复核:连续传代 5–10 代后建议复核 ATAD3C 的基因过表达状态(敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB),确认 SKOV3 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。
八、保存与运输
交付形式为冻存管(货号 SHA-OE-1723)。冻存管请直接置于液氮气相或液相中长期保存,避免 -80℃ 久置导致活力下降;产品通过干冰冷链运输,签收后请及时转入液氮或按培养方案复苏;ATAD3C 稳转株应尽量避免反复冻融,以维持 SKOV3 细胞中目标基因的稳定表达与表型。
九、常见问题(FAQ)
- 长期传代后 ATAD3C 表达会衰减吗?
稳转株表达盒整合于基因组,一般较稳定;但长期传代仍可能出现表达漂移,建议控制代次并定期以 qPCR/WB 复核 ATAD3C 表达水平。 - ATAD3C 过表达水平如何验证?
本 ATAD3C 过表达株(SKOV3)经 qPCR 与 Western blot 双重验证,随货说明载明检测方法与结果判读,研究者亦可在自身体系中复测确认。 - 是否提供培养基与转染试剂配套?
本产品为细胞株,配套完全培养基、冻存液、支原体检测试剂与转染试剂可另行采购(见相关产品推荐)。 - 是否有对照株?
可提供空载体/野生型对照株或对应过表达/敲除配对株(见相关产品),便于设置实验对照。 - 可传代多少代?
建议尽早代次(如 P5 以内)使用以减少遗传漂变;长期传代需定期做 STR 鉴定与功能复核,确认身份与表型稳定。
十、相关产品推荐
· ATAD3C 基因敲除稳转株(loss-of-function 对照)
· 空载体对照稳转株
· 野生型 SKOV3 细胞株(阴性对照)
· ATAD3C 相关抗体与 ELISA 试剂盒(检测表达/功能)
· qPCR / Western blot 验证试剂
十一、产品质控与售后
ATAD3C 基因过表达细胞株由 上海淳麦生物科技有限公司 供应,过表达株提供 mRNA 与蛋白两个层面的表达验证说明(qPCR / Western blot),本产品仅限科研用途,不用于临床诊断或治疗。运输采用干冰/冰袋保温,到货后请按规范复苏;如有质量问题请于签收后规定时间内与售后联系(货号 SHA-OE-1723,规格 T25/冻存管)。


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文献和实验1)Flp-In系统 产生背景 随着新技术的不断革新,针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新,出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术,不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势,广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株,用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点,高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶(Flp)和定点重组技术,将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中
是一个带有HA的标签(tag)的载体(可能是作者自己构建的),wnt1基因通过克隆、酶切以及连接到这个载体的多克隆位点从而使得HA和wnt1能够在转染后融合表达。转染的方法多种多样,钙转、脂质体、PEI等等都可以,反正商业化的转染试剂很多的,甚至于病毒感染。如果这个载体上带有筛选标记,比如neo,就可以通过G418进行筛选从而获得稳定表达wnt1的过表达细胞株。 viola2010 谢谢啊 viola2010 请问常用与载体
谢谢上面这位仁兄,您的解释很有道理,就是这样的过表达细胞株可以用来检测功能吗,比如过表达后细胞株对增值、凋亡方面的影响;通过某种机制引发RNA编辑的话,有什么方法可以研究它是否发生了RNA编辑呢,因为我这个过表达慢病毒感染靶细胞,有些细胞株发生剪接,可有些细胞株就不会。 bigbang_0_0 过表达后有一定的几率导致这种异常的加工,如果有正常的,就拿正常的细胞株做表型模型即可。 要证明有RNA编辑,只需把已知的涉及RNA编辑加工的酶敲低
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