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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
QIAGEN Plasmid Midi Kit
- 保质期:
见包装
- 供应商:
上海然其生物科技有限公司
- 保存条件:
见外包装
- 规格:
10T
EndoFree Plasmid Maxi Kit 去内毒素质粒大提试剂盒|货号:12362(10 次)QIAGEN
中文产品介绍
产品名称:EndoFree Plasmid Maxi Kit 无内毒素质粒大量提取试剂盒 货号:12362 规格:10 次提取
产品简介
EndoFree Plasmid Maxi Kit 采用QIAGEN‑tip 500 重力流阴离子交换柱,搭配 QIAfilter Maxi 过滤柱,无需高速离心即可澄清碱裂解液;内置 Buffer ER 去除革兰氏阴性菌来源内毒素。推荐菌液起始量 100‑250 mL 大肠杆菌 LB 过夜培养物;单次最高产量可达10 mg 高拷贝质粒 / 柯斯质粒 DNA;最终 DNA 内毒素含量<0.1 EU/μg,纯度优于两次氯化铯(CsCl)密度梯度离心。全部缓冲液为无内毒素级别;附带 LyseBlue 裂解指示剂,可视化监控裂解‑中和反应,避免基因组 DNA 污染。适用于对内毒素高度敏感的原代细胞转染、动物体内注射等严苛实验。
注意:为重力流纯化体系,非离心柱试剂盒;Buffer ER 新版配方已去除 Triton X‑114,符合欧盟 REACH 法规要求QIAGEN。
主要特点
- 极低内毒素水平:内毒素<0.1 EU/μg,适合原代细胞、干细胞转染、体内动物实验。
- QIAfilter 快速澄清裂解液:过滤柱直接去除菌体碎片,无需长时间高速离心,节省操作时间。
- 高产量高纯度:单次最高 10 mg 质粒 DNA;阴离子交换去除 RNA、蛋白、基因组 DNA、脂多糖杂质。
- LyseBlue 裂解指示剂:直观判断裂解与中和终点,降低操作失误,减少质粒损失。
- 无有毒试剂:不使用氯化铯、溴化乙锭、苯=酚‑氯仿,操作安全。
- 无内毒素级全套缓冲液,从源头避免外源内毒素引入。
下游应用
原代细胞 / 干细胞转染、动物体内注射实验、RNA 病毒载体构建、体外转录、CRISPR 载体、基因治疗前期体外评估、高灵敏度分子克隆。
试剂盒组分(10 次)
QIAGEN‑tip 500 纯化柱 ×10;QIAfilter Maxi 过滤柱 ×10;Buffer P1(含 RNase A);Buffer P2;Buffer P3;Buffer QBT;Buffer QC;Buffer ER 内毒素去除缓冲液;Buffer QF 洗脱缓冲液;LyseBlue 指示剂。
储存条件
tip 柱、过滤柱及全部缓冲液室温干燥避光保存(15‑25 ℃);RNase A 加入 Buffer P1 后,Buffer P1 需 2‑8 ℃保存,可稳定 6 个月;其余缓冲液室温稳定 2 年;缓冲液出现盐析出,37 ℃水浴溶解后再使用。
仅供科研使用,不可用于临床诊断、预防或治疗用途。
English Product Introduction
Product Name: EndoFree Plasmid Maxi Kit Cat.No.: 12362 Size: 10 preps
Product Description
The EndoFree Plasmid Maxi Kit utilizes gravity‑flow anion‑exchange QIAGEN‑tip 500 columns together with QIAfilter Maxi cartridges for lysate clarification without high‑speed centrifugation. The integrated Buffer ER step removes bacterial endotoxin. Recommended starting culture volume: 100‑250 mL E. coli overnight LB culture. Yield up to 10 mg high‑copy plasmid or cosmid DNA, with final endotoxin level <0.1 EU/μg, purity exceeding double CsCl density‑gradient centrifugation. All buffers are endotoxin‑free grade. Supplied LyseBlue reagent visualizes alkaline lysis‑neutralization reaction to minimize genomic‑DNA contamination. Ideal for endotoxin‑sensitive applications such as primary‑cell transfection and in‑vivo animal injection experiments.
Note: Gravity‑flow tip‑based system, not spin‑column kit. New‑formula Buffer ER is Triton X‑114‑free and REACH‑compliantQIAGEN.
Key Features
- Ultra‑low endotoxin: <0.1 EU/μg, well‑suited for primary cells, stem‑cell transfection and in‑vivo animal studies.
- QIAfilter cartridge clarifies lysate directly, eliminating lengthy high‑speed centrifugation.
- High yield and high purity: up to 10 mg plasmid DNA per prep; anion‑exchange removes RNA, protein, genomic DNA and lipopolysaccharide contaminants.
- LyseBlue lysis indicator visualizes lysis‑neutralization end‑point to reduce handling‑induced DNA loss.
- Hazardous‑reagent‑free workflow: no CsCl, ethidium bromide or phenol‑chloroform.
- Complete set of endotoxin‑free buffers to prevent exogenous endotoxin contamination.
Downstream Applications
Primary / stem‑cell transfection, in‑vivo animal injection, viral vector construction, in‑vitro transcription, CRISPR vector preparation, pre‑clinical in‑vitro gene‑therapy evaluation, demanding molecular cloning.
Kit Contents (10 preps)
QIAGEN‑tip 500 tips ×10; QIAfilter Maxi cartridges ×10; Buffer P1 (with RNase A); Buffer P2; Buffer P3; Buffer QBT; Buffer QC; Buffer ER; Buffer QF; LyseBlue reagent.
Storage
Store tips, cartridges and all buffers dry at room temperature (15‑25 °C). After adding RNase A to Buffer P1, store Buffer P1 at 2‑8 °C (stable for 6 months). Remaining buffers stable for 2 years at room temperature. Dissolve salt precipitates at 37 °C before use.
For research use only. Not intended for diagnosis, prevention or treatment of human or animal diseases.
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文献和实验明确标注货号 12362 的 SCI/PMC 英文文献
- Protocol to study cis‑regulatory activity of GWAS loci for specific gene promoters in human primary astrocytes using luciferase reporter assay STAR Protocols, 2024, PMC:PMC11460453PMC
原文:EndoFree plasmid maxi kit (QIAGEN, Cat# 12362). 研究:人原代星形胶质细胞双荧光素酶报告,GWAS 顺式调控元件功能验证;原代细胞必须无内毒素质粒。
- Generating and Validating Transgenic Mosquitoes with Transposon‑Mediated Transgenesis Cold Spring Harbor Protocols, 2024, PMC:PMC11008536
原文:Purify donor and helper plasmids using EndoFree Plasmid Maxi kit (QIAGEN, Cat.No. 12362). 研究:蚊子胚胎显微注射,转座子介导转基因,体内注射级质粒制备。
- LADL‑CRISPR system for programmable genomic anchoring in mouse embryonic stem cells Nucleic Acids Research, 2019, PMC:PMC6599567
原文:All plasmids to be transfected were maxi‑prepped with Qiagen Endofree Maxiprep kit (Qiagen, 12362). 研究:小鼠胚胎干细胞 CRISPR 基因组锚定;干细胞对内毒素高度敏感。
- Enhancing the Yield of Therapeutic Plasmids in Laboratory‑Scale Maxiprep Preparations through a Modified Alkaline Lysis Approach Journal of Microbiological Methods, 2023
原文:Endofree plasmid maxiprep kit‑Qiagen, Cat.# 12362. 研究:治疗性质粒实验室制备,优化碱裂解工艺。
包括柱离心式DNA胶回收及PCR产物快速纯化试剂盒、柱离心式质粒小量快速抽提试剂盒、柱离心式高纯质粒小量快速抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒小量快速抽提试剂盒、 质粒抽提、DNA胶回收、PCR产物纯化柱离心式多用途小量纯化试剂盒、柱离心式质粒中量抽提试剂盒 、柱离心式高纯度质粒中量抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒中量抽提试剂盒 、核酸纯化小柱(质粒小抽、胶回收)、核酸纯化大柱(质粒中抽、大抽)等10个产品。 现因公司产品结构调整,转让该系列试剂盒的配方、生产工艺、生产设备。包教
需求来确定所用的模板质粒。重组质粒载体构建可以经过酶切酶连、无缝克隆、Gateway 克隆等方式将目的片段连接到目标载体上,或者对载体上的一些元件进行改造。改造好的质粒转入大肠杆菌中进行扩增及抽提。 3、质粒抽提的一般操作流程 从培养的大肠杆菌中抽提质粒,一般需要经过大肠杆菌培养、菌液收集、菌体裂解、基因组 DNA 及蛋白沉淀、质粒吸附、质粒漂洗、质粒洗脱、质粒检测、质粒保存等流程。 内容来源:QIAGEN 凯杰
molecular)将 DNA 聚合酶与抗体紧密结合,只有高温条件才能激活 DNA 聚合酶活性,进一步提高了 PCR 产物的特异性。实验无需冰上配置,配置后的反应体系更可在室温下保存 3 天也不影响 PCR 实验结果。 内容来源:QIAGEN 凯杰
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