外周血percoll提取法

外周血单个核细胞的分离:Ficoll分层液法和Percoll分层液法

　　外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090，血小板为1.030～1.035。为此利用一种密度介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液（分层液）做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。 　　（一）Ficoll分层液法

单核细胞分离原理、方法及要点

基本原理：本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法，主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作，且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材1）外周血单个核细胞2）1×PBS和10×PBS（无Ca2+、Mg2+，0.5mM EDTA），胎牛血清（56℃，30分钟加热灭活），HCl 1mol/L。Percoll分层液（密度=1.130g/ml,商品），4g/L台盼蓝染液（溶解在PBS液中)。3）50ml聚丙烯圆锥管，毛细吸管，移液管（1、2、10ml）。4）CO2

细胞试验基本方法

单核细胞的分离基本原理本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法，主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作，且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材·外周血单个核细胞（参见实验1）　　·PBS1×和PBS10×（无Ca2+、Mg2+），含0.5mM EDTA　　·胎牛血清（56℃，30分钟加热灭活）　　·HCl1mol/l　　·Percoll分层液（密度=1.130g/ml,商品）　　·4g/l台盼蓝染液（溶解在PBS液中）　　·50ml聚丙烯圆锥管　　·毛细