percoll提取外周血单核细胞

外周血DNA提取技术

/ul)= A260*50*稀释倍数/1000 DNA纯度的判定： A260/A280 比值应介于1.7-2.0之间。 方法二： 分别采集外周静脉血5ml，2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)抗凝待用(要求采血至分离白细胞之间隔时间在室温下放置不超过2h，4℃放置不超过5h，以防白细胞自溶)。 采用NaI提取法提取外周血白细胞基因组。 （1）取外周抗凝血（全血）100ul于Ep管中，12000rpm离心12min （2）弃上清，加双蒸水200ul溶解，摇匀20

【分享】外周血的简便提取方法

从外周血提取DNA是一个经常遇到的问题，当然可以用试剂盒提取，不过代价还是有点大，并且不方便，定试剂总要等上几天，如果血液标本不稀缺资源，不妨用一些简便方法提取。方法一(1) 取抗凝血5ml在沉淀中加入15ml PBS，混匀，离心2000r/min10min。(2) 将血浆转至新的试管中，-70℃保存。(3) 将血细胞转入另一支试管中(10ml或50ml)加入尽可能多的冷的蒸馏水混匀。(4) 将其插入冰内5～10min或放入-20℃15min。(5) 将上述混合液从冰中或-20℃取出

外周血单个核细胞的分离:Ficoll分层液法和Percoll分层液法

　　外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090，血小板为1.030～1.035。为此利用一种密度介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液（分层液）做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。 　　（一）Ficoll分层液法