3型脊髓灰质炎-病毒(PV-3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法

3型脊髓灰质炎-病毒(PV-3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

基本信息
产品名称：3型脊髓灰质炎-病毒(PV-3)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
英文名称：Poliovirus 3 Detection Kit (Real-Time PCR Method)
包装规格：50 份 / 盒
适用样本：咽拭子、粪便等
储存条件：-20℃避光，有效期 12 个月；避免反复冻融 (≤5 次)
适用仪器：ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

预期用途
脊髓灰质炎（脊灰）是由脊灰病毒引起的一种急性传染病，主要感染五岁以下儿童。病毒主要通过粪便-口腔途径在人与人之间传播，或者不太常见的是通过普通媒介（如受污染的水或食物）传播，并在肠道中繁殖， 可以侵入神经系统并导致瘫痪。临床表现主要有发热、咽痛和肢体疼痛等，部分病人可发生弛缓性麻痹。脊髓灰质炎通常是由天然存在的野生型脊髓灰质炎-病毒引起的，包括 1 型、2 型、3 型三种血清型。
本试剂盒适用于检测标本中的 3 型脊髓灰质炎-病毒RNA，适用于 3 型脊髓灰质炎-病毒感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

检验原理
本试剂盒利用一步法反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测技术，针对 3 型脊髓灰质炎-病毒基因设计特异性引物和 Taqman 荧光探针，对 3 型脊髓灰质炎-病毒 RNA 进行体外扩增检测，实现对标本中的 3 型脊髓灰质炎-病毒 RNA 的定性检测。

试剂组成
包装规格    50T/盒
PV-3 反应液    500μL×2 管
酶液    50μL×1 管
PV-3 阳性质控品    250μL ×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管

操作流程
样本处理
咽拭子 / 粪便：用采样液洗脱，离心取上清；或用 RNA 提取试剂盒纯化核酸。
质控品：直接使用，无需提取。
反应体系配制（25 μL）
PV-3 反应液：19 μL
酶液：1 μL
模板（样本 RNA / 质控品）：5 μL
扩增程序
UNG 处理：37℃，2 min（1 循环）
预变性：95℃，3 min（1 循环）
扩增（40 循环）：95℃ 5 s → 55℃ 40 s（FAM 通道采集荧光）
结果判读
阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线； 
阴性：样本检测结果无 Ct 值，且无特异性扩增曲线；
可疑：样本检测结果 40＜Ct 值≤45，建议重复检测，如果检测通道仍为 40

质量控制标准
阴性质控品：无特异性扩增曲线或无 Ct 值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数增长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

注意事项
分区操作：严格区分样本处理区、试剂配制区、扩增区，防止交叉污染。
耗材无酶：使用无 RNase/DNase离心管、吸头。
样本保存：2–8℃ ≤24 h；-70℃长期保存，冻融≤3 次。
仅限科研 ：试剂盒仅用于科研。