病原核酸检测试剂盒性能验证

体液样本游离核酸/病原微生物核酸提取

游离核酸 （包括cfDNA和cfRNA) 是指在生物体液中发现的游离于细胞外的核酸，游离核酸的来源分为内源性和外源性，可以是细胞凋亡释放到体液中的内源性核酸，也可以是人体感染病原微生物后由微生物产生的外源性核酸。游离核酸可以用于癌症的早期诊断、预后评估，也可以用于病原感染的诊断，根据实验目的不同，采集体液样本类型不同，核酸纯化方案也有一定区别。

核酸杂交法检测病原微生物

核酸杂交技术是根据两条互补的核苷酸单链可以杂交结合成双链的原理所建立，用一段已知序列的放射性或非放射性标记的核苷酸单链做探针，与待检标本中的DNA杂交来探查待检标本中有无与之相互补的核酸。该方法特异性高，但敏感性低于PCR方法。 　　本实验学习用非放射性标记物-地高辛(DIG)标记DNA片段作探针，用斑点杂交法检测病原微生物DNA的方法。 　　【原理】 　　用地高辛（DIG）类固醇半抗原标记特异DNA片段做探针，与待检标本中DNA杂交，然后加入碱性磷酸酶标记的抗－DIG抗体

文献速递：患者福音？宏基因组下一代测序用于尿路感染诊断提高诊断精度

/组织学和临床结果的离散特征。尿沉渣来源的 DNA 测序对 UTUC 具有很高的诊断价值，灵敏度为 82.2%，特异性为 100%。 病原微生物NGS检测是近年来的热点，但是从人体体液样本中提取的核酸十分有限，常规定量方法甚至可能检测不到核酸信号，这给感染源的准确检测带来了巨大挑战。上述两篇研究针对尿液提取核酸信息进行下游测序建库，采用的是QIAamp DNA Micro Kit。QIAamp DNA Micro Kit适用于从拭子和体液中纯化和富集细菌微生物组DNA。在纯化过程中，该试剂盒能高