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- 漂片免疫荧光单标双色共聚焦3D成像全套
- 全国
- 2026年07月06日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称：
漂片免疫荧光单标双色共聚焦 3D 成像全套 厚组织漂片染色白激光共聚焦多层扫描 3D 重构实验服务
- 规格：
张
一、服务简介
技术优势说明
二、适用样本范围
- 30–200μm 厚度组织振动切片；
- 直径小于 200μm 类器官；
- 细小神经、血管等小型厚组织。
三、完整标准实验流程
- 实验动物灌注固定，取目标组织浸泡通用固定液 4℃过夜，固定液禁止冷冻结冰；
- 无菌 PBS 缓冲液洗涤组织，每次 5min，共 3 次；
- 无菌 PBS 浸泡，4℃低温暂存待送检，建议 3 日内送达；
- 振动切片机切片，可按需指定 30–200μm 切片厚度；直径 200μm 以内类器官、微小组织无需切片；
5 悬浮漂片免疫荧光标记；
- 将染色完成组织贴片；
- 抗荧光淬灭封片剂封片；
- 超高分辨率白激光共聚焦 3D 多层扫描成像，也可单独开展高分辨率全景扫描；
- 输出成像原始文件、导出图片、3D 动态视频。
四、不同样本送样、固定、运输规范
（一）动物厚组织样本
- 动物灌注固定，目标组织放入固定液 4℃过夜；
- PBS 洗涤 3 次，每次 5min；
3 PBS 浸润样本，4℃避光运输，3 日内送检。
（二）类器官样本
- 收集标准：单种处理类器官总量不少于 200 个，避免过度生长造成形态破损；
- 清洗：移除培养基，常温 PBS 清洗两次；
- 固定：每孔添加固定液室温固定 1h 后去除；
- 冰上操作，预冷含 BSA 的 PBS 缓冲液吹离基质胶，转移离心管；
- 1000rpm 离心 3min，弃上清，无菌 PBS 轻柔重悬；
- 离心管密封缓冲气袋包裹，4℃轻拿轻放运输，3 日内送检；
- 直径超过 200μm 的类器官需进行切片处理。
通用送检要求
五、交付成果
漂片免疫荧光双标三色共聚焦3D成像全套
漂片免疫荧光3标4色共聚焦3D成像全套
漂片免疫荧光4标5色共聚焦3D成像全套
免疫荧光单标双色（漂片）
免疫荧光双标三色（漂片）
免疫荧光3标4色（漂片）
免疫荧光4标5色（漂片）
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文献和实验荧光定量图像分析 激光扫描共聚焦显微镜不仅可以对生物样本进行二维和三维图像分析，还可以与荧光探针相结合，在图像处理的同时，进行图像定量分析。例如细胞面积及周长的测定和细胞核面积的测定，从而可以将生物体的形态学特征进行量化，提高了研究结果的准确性。激光扫描共聚焦显微镜能对单标记或双标记生物样品的共聚焦荧光定量分析，并显示荧光沿Z轴的强度变化。根据实验要求设置好仪器测试的各种参数后，计算机便能自动进行数据采集，并将结果储存起来，供以后分析和输出。定量图像分析结果的表达有数字、直方图和二
-rat-Tex-Red（红）。（2）我的做法是两种一抗同时孵育，然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索，我感觉一抗4度孵育过夜比较好，背景比较清晰。（3）我的阳性对照用的是阳性组织切片，阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG，荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。（4）封闭血清与二抗来源动物一致，我用的是10%的正常donkey血清。（5）其余步骤同一般免疫荧光单标操作。3、问：本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光，二抗为FITC标记，想请教各位大侠：（1）抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定
光标记物。 (4)封闭血清与二抗来源动物一致，我用的是10%的正常donkey血清。 (5)其余步骤同一般免疫 荧光单标操作。 2、问：用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白，两者操作过程有哪些不同? 参考见解：只是固定方法不同。细胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一样的。 3、问：本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光，二抗为FITC标记，想请教各位大侠： (1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
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