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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
20
- 灵敏度:
0.78125ng/mL
- 样本:
血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物:
血清/血浆
- 适应物种:
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用:
ELISA试剂盒
- 检测方法:
ELISA法
- 检测范围:
1.5625ng/mL-50ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
通过特异性抗人HSP-27/HSPB1单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的HSP-27/HSPB1结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与HSP-27/HSPB1含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数:
产品名称:人热休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)ELISA试剂盒
英文名称:Human HSP-27/HSPB1 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围:1.5625ng/mL-50ng/mL
灵敏度:0.78125ng/mL
特异性:与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期:6个月(2-8℃保存)。
检测流程:
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合人热休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的HSP-27/HSPB1会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别HSP-27/HSPB1的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-HSP-27/HSPB1-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中HSP-27/HSPB1浓度呈正相关。
数据及参考曲线:
| 校准品浓度(ng/mL) | 50.00 | 25.00 | 12.50 | 6.25 | 3.13 | 1.56 | 0.78 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.659 | 1.614 | 0.800 | 0.496 | 0.381 | 0.170 | 0.089 | 0.015 |
| 校正OD值 | 2.645 | 1.599 | 0.786 | 0.482 | 0.366 | 0.156 | 0.075 | 0.000 |

关键实操技巧
1.加样技巧
一次性换新枪头,垂直贴孔壁低位加液;避免气泡、飞溅交叉污染;整板加样速度均匀统一。
2.温育控温
须37℃恒温、封板膜严实防蒸发冷凝;时间严格卡死,过长背景高、过短信号低。
3.洗板核心
每孔注满不溢出,浸泡≥30 s;拍干用无尘吸水纸,杜绝残留;洗板不足直接高背景、假阳性。
4.样本规范
杜溶血、脂浊、污染样本;禁止反复冻融;严禁含 NaN₃抑制 HRP 活性;浓度超标只用试剂盒配套稀释液。
5.显色与读数
全避光;整板显色时长一致;加终止液立刻读数,放置越久数值漂移越大。
6.基础质控
样本、标准均做复孔;室温洁净避光操作;试剂分装取用,减少反复开盖失效。
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Procedure Dilute p27 monoclonal antibody 1:1000 (v/v) in Carbonate Coating Buffer. Add 100 µl/well and incubate o/n @ 4°C or 1 hr @37°C. Wash 3X with TBST (pour onto plate, empty into sink, hit onto towel 3x to clear wells
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