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FISH(单标)+IF 双标扫描 核酸蛋白共定位成像实验外包

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  • FISH(单标)+IF 双标扫描 核酸蛋白共定位成像实验外包
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  • 2026年07月06日
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      上海经科化学科技有限公司

    • 服务名称

      FISH(单标)+IF双标扫描全套

    • 规格

    一、服务简介

    本服务为分轮标记、分次全景扫描、图像融合一体化科研实验方案,单张组织切片可同步完成核酸片段 FISH 检测与两种靶蛋白免疫荧光检测,实现核酸片段与双靶蛋白共定位、定性、半定量分析,仅可用于科研实验,不可用于临床诊断。
     

    检测技术背景

    常规同步检测存在两大技术难点:免疫荧光需要高温抗原修复暴露抗原,高温会造成目标核酸断裂,引发 FISH 假阴性;若先开展 FISH 染色再进行蛋白免疫荧光,FISH 荧光信号会在后续实验中发生淬灭,两类检测无法同时获得有效数据。
     
    本方案将 FISH 核酸标记、两种靶蛋白免疫荧光分独立轮次分步完成,每轮染色后单独扫描留存最佳荧光图像,全部实验结束后通过软件高精度融合全部通道,同步保障核酸与蛋白检测结果可靠性。
     

    二、服务核心优势

    1. 同一切片完整留存核酸、两种靶蛋白多类荧光信号,规避荧光淬灭、多荧光染料互相串色干扰;
    2. 搭配 TSA 信号放大技术,阳性信号显著增强,检测灵敏度更高,同源、异源一抗均可使用;
    3. 高分辨率全景成像,以 DAPI 信号作为对齐基准,采用 0.5 像素高精度重合算法匹配每轮扫描画面,融合图像组织匹配完整、检测结果精准;
    4. 配套轻量化图像浏览分析软件,普通办公电脑即可读取全景文件,一键输出共定位细胞数量、阳性比率、细胞密度等量化参数,无需高端服务器硬件。

     

    三、完整标准实验流程

    1. 样本准备
    2. 热修复处理
    3. 蛋白酶 K 消化
    4. 核酸片段 FISH 标记
    5. DAPI 复染细胞核并封片
    6. 切片高清全景扫描,留存 FISH 原始图像
    7. 拆除盖玻片,洗脱核酸探针
    8. 专用荧光淬灭设备清除 FISH 荧光基团
    9. 抗原修复
    10. 内源性过氧化物酶封闭
    11. 血清封闭
    12. 第一种一抗孵育
    13. HRP 标记二抗孵育
    14. iF488-TSA 荧光标记
    15. 抗体洗脱液洗脱本轮一抗、二抗
    16. 再次血清封闭,开展第二轮蛋白标记:第二种一抗→HRP 二抗→iF647-TSA 标记
    17. DAPI 复染细胞核、封片,执行第二轮全景扫描
    18. 去除盖玻片,抗体洗脱液清洗切片
    19. 荧光去除设备清除本轮荧光基团
    20. 全部轮次实验完成后,软件对所有扫描图像进行高精度融合处理

     

    四、样本适配与送样运输规范

    1. 石蜡切片常温保存运输;冰冻切片 - 20℃保存运输。
    2. 细胞爬片、细胞滴片、细胞涂片不适用本方案:拆除盖玻片易造成细胞脱落,多轮扫描无法保证视野完全重合,图像无法正常融合。
    3. 实验全程切片组织形态结构必须保持不变,否则各轮扫描图像无法匹配融合。

     

    五、交付成果

    FISH 核酸通道、两种靶蛋白各通道分层扫描原图、多通道高精度融合全景图像、核酸与双靶蛋白共定位定量分析数据文件。
     
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