- ￥850 - 1700
- 抗原抗体的结合非常特异
- 全国
- 2026年06月23日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称：
免疫荧光双标三色扫描全套（芯片）
- 规格：
双标三色/单标双色
| 规格： | 双标三色 | 产品价格： | ￥1700.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 单标双色 | 产品价格： | ￥850.0 |
一、服务简介
1. 检测原理
- 荧光二抗法：选用两种不同种属一抗共同孵育切片，搭配对应不同荧光标记二抗，依靠抗原抗体特异性结合，区分两种靶蛋白荧光信号；
- TSA 信号放大法：依靠酪胺信号放大技术，荧光酪胺经 HRP 催化共价结合靶蛋白，一抗、二抗仅非共价结合，微波可洗脱去除前一轮抗体，不存在同源 / 异源一抗交叉干扰，更换荧光染料即可完成多靶标标记，信号灵敏度更高。
2. 组织芯片优势
3. 全景数字扫描
二、两大实验整体流程
方案一 荧光二抗法
方案二 TSA 信号放大法
三、详细实验操作步骤
（一）荧光二抗法
- 脱蜡至水：三类脱蜡液各 10min，梯度无水乙醇洗涤后蒸馏水清洗；
- 抗原修复：切片置于修复缓冲液微波沸腾 10min，避免干片；冷却后 PBS 摇床洗涤 3 次，每次 5min，优先柠檬酸修复液；
- 画圈血清封闭：组织边缘划线防试剂流失，室温封闭 30min；山羊一抗用兔血清，其余采用 BSA 封闭；
- 双一抗孵育：两种异源一抗稀释后 4℃湿盒过夜孵育；
- 荧光二抗孵育：PBS 充分洗涤，加入匹配两种荧光标记二抗室温孵育 50min；
- DAPI 避光孵育 10min 复染细胞核，PBS 洗净；
- 自发荧光淬灭剂处理 5min，流水冲洗；
- PBS 洗涤后使用抗荧光淬灭封片剂封片；
- 切片上机完成全景数字扫描。
（二）TSA 信号放大法
- 脱蜡、抗原修复、画圈步骤同荧光二抗，增加 3% 双O水处理 25min 封闭内源过氧化物酶；
- 首轮标记：一抗 4℃过夜→HRP 二抗室温孵育→避光 iF555-TSA 孵育 10min，TBST 洗涤；
- 微波处理：柠檬酸缓冲液加热沸腾 10min，洗脱本轮一抗、二抗；
- 再次血清封闭，开展第二轮一抗、HRP 二抗、iF488-TSA 标记流程；
- DAPI 染核、自发荧光淬灭、封片、全景扫描步骤与二抗法一致。
四、荧光染料适配
五、送样运输要求
- 组织样本置于 10 倍体积通用固定液固定 24h 以上，常温制备石蜡包埋样本；严禁冷冻，不可长时间固定；
- 成品石蜡芯片切片常温保存运输。
六、交付成果
免疫荧光双标三色扫描全套（芯片）
免疫荧光3标4色扫描全套（芯片）
免疫荧光4标5色扫描全套（芯片）
免疫荧光5标6色扫描全套（芯片）
免疫荧光6标7色扫描全套（芯片）
免疫荧光7标8色扫描全套（芯片）
免疫荧光8标9色扫描全套（芯片）
免疫荧光9标10色扫描全套（芯片）
免疫荧光10标11色扫描全套（芯片）
免疫荧光11标12色扫描全套（芯片）
免疫荧光12标13色扫描全套（芯片）
免疫荧光13标14色扫描全套（芯片）
免疫荧光14标15色扫描全套（芯片）
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文献和实验pyralis和海参Renilla reniformis的luc和ruc基因是广泛应用的BL报告基因。此外，一些新的基因cDNAs也已克隆和表达。有意思的是一些新的基因，如那些能够发射红光和绿光的Phrixothrix hirtus荧光素酶，各种突变的发不同波长光的萤火虫荧光素酶。不同的荧光素酶的特性如表1。此外最近克隆和纯化的重组辣根过氧化物酶（HRP）成为一个新的生物技术工具，在不久的将来有较大的期待。实际上，高效的HRP的底物已经商业化。HRP是与CL检测组合应用最广泛的酶之一。双报告基因系统在多重
免疫胶体金技术的基本原理胶体金是一种常用的标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold
胶体金是一种常用的标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA
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