- ￥3620 - 23550
- Sino Biological
- 北京
- 10804-H08H-UE
- 2026年05月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
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-20℃ to -80℃
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12个月
- 英文名：
Human Latent TGF-beta 1 / TGFB1 Protein (His Tag), Endotoxin-Free
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
50.00 µg/500.00 µg
| 规格： | 50.00 µg | 产品价格： | ￥3620.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500.00 µg | 产品价格： | ￥23550.0 |
蛋白名称：重组人Latent TGF-beta 1 / TGFB1蛋白(His标签)
蛋白构建：A DNA sequence encoding the full length of human TGFβ1 (NP_000651.3) (Met 1-Ser 390) was fused with a C-terminal polyhistidine tag.
表达宿主：HEK293 Cells
蛋白活性：1.Refer to: Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized Human TGF beta 1 His (Cat: 10804-H08H) at 2 μg/ml (100 μl/well) can bind Human TGFBR2 His & hFc (Cat: 10358-H03H), the EC50 of Human TGFBR2 His & hFc is 5-35 ng/mL. 2.Refer to: Loaded Recombinant Human TGF-beta RII/TGFBR2 Protein, hFc Tag (Cat. No. 10358-H02H ) on ProA Biosensor, can bind Recombinant Human TGF beta 1 Protein (Latent), His Tag (Cat. No. 10804-H08H) with an affinity constant of 47.1 nM as determined in BLI assay (Sartorius Octet Red384) .
蛋白内毒素：< 0.5 EU per mg protein.
预测N端：Leu 30 & Ala 279
蛋白分子量：The recombinant human latent TGFβ1 consists of 370 amino acids and has a calculated molecular mass of 42.4 kDa.
蛋白NP号：NP_000651.3
蛋白氨基酸序列：Met1-Ser390
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文献和实验His 标签蛋白纯化效果不理想，宝宝心里苦呀。今天，小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面： 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高，容易导致蛋白炭化；功率过低，蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率，同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素，如：金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时，优化缓冲液的pH、盐
行 HIS 标签的捕获。 2、HIS标签蛋白结合了，但是洗脱不充分 原因一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱，或者通过降低 pH 寻找最佳洗脱条件。需要注意的是，pH 低于 3.5 容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议 1 降低蛋白浓度。可以减少上样量，或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱，增加蛋白稀释度。 建议 2 试用去污剂或者改变 NaCl 的浓度，或者使用变性剂 (4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素） 在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互
与6′His标签蛋白间形成的二硫键。这在目标蛋白中包含相对多的半胱氨酸时尤其重要。 杂蛋白与6′His标签蛋白的非特异性结合也可能是通过疏水作用产生。在洗脱液中加入以下物质可以减少因此而产生的非特异性：非离子洗涤剂（Trion X-100或Tween 20）;30%的乙醇或甘油。注意，不同的蛋白纯化所需加入的最佳浓度不同，需要试验摸索。 杂蛋白也可能是截断的标签蛋白。这样的杂蛋白可以用Western Blot技术很容易的识别。通过质粒测序，检查出内部的翻译起始位点或成熟前的终止
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