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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
舒桐科技
- 保存条件:
-80°C长期保存,-20°C短期保存
- 规格:
250U
1.产品介绍
Uracil-DNA Glycosylase(UDG),即尿嘧啶-DNA糖基化酶,是DNA碱基切除修复(BER)途径中第一个关键酶,在维持基因组完整性和分子生物学实验中发挥着重要作用。
UDG具有高度特异性底物识别能力,能够精准识别DNA链中由dUTP掺入或胞嘧啶自发脱氨产生的尿嘧啶碱基。其作用机制是水解尿嘧啶与脱氧核糖之间的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶,同时在DNA骨架上形成一个无碱基位点(AP位点)。这一过程不需要辅助因子,且催化效率极高。UDG对RNA链中的尿嘧啶或双链DNA中错配的其他碱基均无活性,确保其只作用于正确的修复目标。

2.产品参数
|
参数 |
规格 |
|
来源 |
大肠杆菌重组表达 |
|
分子量 |
~29 kDa |
|
浓度 |
5000 units/ml |
|
活性 |
糖基化酶活性 |
|
纯度 |
≥95% (SDS-PAGE) |
|
内毒素 |
<1 EU/μg |
|
储存缓冲液 |
10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,0.5 mM EDTA,1 mM DTT,100 µg/ml BSA,50% Gly,pH 7.5 |
|
10 x 反应缓冲剂 |
200 mM Tris-HCl,10 mM DTT,10 mM EDTA,pH 8 |
|
储存条件 |
-80°C长期保存,-20°C短期保存 |
3.产品规格
|
规格 |
货号 |
浓度 |
体积 |
|
250U |
GR300201 |
5000U/mL |
50μL |
|
1250U |
GR300202 |
5000U/mL |
250μL |
|
2500U |
GR300203 |
5000U/mL |
500μL |
4.应用场景
PCR污染控制:UDG在PCR实验中最主要的应用是防止气溶胶污染。通过以dUTP替代dTTP掺入扩增产物,UDG可选择性降解含dU的污染物,而天然DNA模板(含dT)不受影响。此技术广泛应用于qPCR、RT-qPCR等检测体系,尤其在临床核酸检测(如新冠病毒)中显著降低假阳性风险。
USER克隆(Uracil特异性切除试剂):UDG与核酸内切酶VIII.联用,可在dU位点产生黏性末端,简化载体与插入片段的定向连接,用于构建质粒或TALE蛋白组装。
链特异性RNA文库构建:通过dUTP标记第二链cDNA,UDG处理可选择性去除非目标链,保留链特异性信息,提高转录组分析的准确性。
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文献和实验1. Jacob L.P., et al. (2021). The N-terminal domain of uracil-DNA glycosylase: Roles for disordered regions. DNA Repair (Amst) . 101:103077.
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