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Frcas9核酸酶
企业认证
CRISPR-Cas核酸酶是目前最为广泛使用的基因编辑工具,在基础科研以及临床应用方面都有着广阔的应用前景[1]。然而,目前应用最广泛的SpCas9始终面临的一个关键问题是脱靶效应。它会导致基因突变、甚至癌症等毒副作用,严重阻碍SpCas9在基础研究和临床中的应用[2]。为了解决脱靶效应问题,近年来有许多的研究集中于对现有的SpCas9进行改造,提高其切割特异性[3,4]。然而,改造后的SpCas9虽然脱靶效应明显减少,但其靶点切割活性也会受到影响。本项专利CRISPR-FrCas9是目前已知的切割效率最强、脱靶效应最低、特异性最好、PAM限制最少的CRISPR,显著优于SpCas9,极大程度保证了基因治疗的安全性及有效性。该研究也成功发表于《Nature Communications》中[5]。
FrCas9属于Type II-A型CRISPR,与SpCas9的同源性小于80%,体积为1372个氨基酸(图A、B)。FrCas9的PAM为5′-NNTA-3′,SpCas9的PAM为5′-NGG-3′,研究人员直接在人基因组上选择11个位点同步比较FrCas9与SpCas9及不同SpCas9高保真变体(SpCas9-HF1、HiFi-Cas9和eSpCas9)的切割效率及脱靶效应。结果显示,FrCas9的在靶reads数均高于SpCas9及其高保真变体,且FrCas9在多个位点均未检测到脱靶,说明FrCas9具有较高的切割效率以及较低的脱靶效应(图C、D),为安全高效的基因编辑临床治疗及基础科研提供更多选择。
FrCas9产品优势
1、切割效率高:在NGTA PAM下,其切割效率高于SpCas9;
2、脱靶效应低:脱靶效应极低,甚至低于不同种类的高保真型SpCas9;
3、提供sgRNA设计服务及质粒构建服务;
4、专利授权费低于SpCas9,可进行授权合作。
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