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- 技术资料
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充足
产品名称:pLVV-CMV-P2A-Puro 慢病毒表达载体
产品货号(型号):1098
产品规格:未提供规格信息
核心优势:
- 基于金斯瑞优化的慢病毒骨架,具备高滴度包装能力与稳定整合特性;
- CMV启动子驱动目的基因表达,强效且广泛适用于哺乳动物细胞;
- 含P2A自切割肽序列,支持多基因共表达(如目的基因与Puromycin抗性基因共表达);
- 携带Puro(嘌呤霉素)抗性基因,便于高效筛选稳定转导细胞;
- 已去除大部分辅助病毒基因(如gag/pol/env),安全性高,符合BSL-2操作规范。
同系列产品:
- pLVV-CMV-GFP(货号:1095)
- pLVV-EF1α-P2A-Puro(货号:1097)
- pLVV-U6-sgRNA-CMV-EGFP-P2A-Puro(货号:1102)
- pLVV-CAG-P2A-Blast(货号:1105)
- pLVV-CMV-Luc-P2A-Puro(货号:1108)
FAQ:
- Q:该载体是否包含VSV-G包膜蛋白编码序列?
A:不包含。pLVV系列为转移载体(Transfer Vector),需与包装系统(如psPAX2 + pMD2.G)共转染以产生假型慢病毒。 - Q:P2A序列是否会影响下游Puro蛋白功能?
A:不会。P2A经核糖体跳跃机制实现高效切割,Puro蛋白可正常折叠并发挥筛选功能。 - Q:能否用于原代细胞或难转染细胞?
A:适用,但需配合高滴度慢病毒颗粒及优化感染条件(如添加Polybrene、离心感染等)。 - Q:该载体是否含WPRE和cPPT元件?
A:是。金斯瑞pLVV系列标准载体均含WPRE(Woodchuck Hepatitis Virus Posttranscriptional Regulatory Element)和cPPT(Central Polypurine Tract),显著提升mRNA稳定性与核转运效率。 - Q:抗性筛选推荐浓度是多少?
A:嘌呤霉素工作浓度需根据细胞类型预实验确定,常见范围为1–10 μg/mL;建议进行杀灭曲线实验以确定最佳筛选浓度。
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文献和实验1.常用载体分类:2,常用载体元件介绍:(1) 启动子:启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子主要分为广谱启动子和特异性启动子。广谱启动子为在各种组织、细胞上广泛表达的启动子;特异性启动子为在特异性组织或者细胞类型上表达的启动子。常用广谱启动子有CAG,CMV,EF1a,PGK等,还包含启动RNA的III型启动子U6和H1启动子;常用特异性启动子如成熟神经元特异性启动子hSyn,投射神经元特异性启动
类型的神经元也会展现出各种细微的突起特征,以适应多样的神经回路。不同类型的神经元在大脑中形成了复杂的回路。因此,了解详细的神经元形态对于理解正常的神经功能和病理机制至关重要。本文开发了一种策略,在整个大脑中稀疏标记相同类型的神经元,并在自闭症动物模型⸺Shank3 基因敲除(KO)小鼠中测试了其应用。 使用病毒 AAVPHP.eB-hSyn-DIO-EGFP-P2A-EGFPf 注射方式 眼眶后注射 注射计量 病毒滴度1.3E+12 vg/mL,注射体积 100μL 实验
EGFP 荧光表达。 检测结果显示靶点一和靶点二均有效果,靶点一的效果优于靶点二。 TP53 基因敲除 293T 细胞筛选 实验步骤 1) 转染前 24 小时将 293T 铺到 6 孔板中。 2) 按照下列体系制备质粒稀释液 pCas9/gRNA1-P531 0.7ug pLV-EGFP(2A)puro 0.1ug DMEM 培养基 X ul 总体积 50ul 3) 准备转染
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