DEAE磁珠(30-150μm) Magrose DEAE

产品简介
Magrose DEAE 是一种弱阴离子交换磁珠，具有快速的磁响应性、丰富的离子交换能力和极高的蛋白结合能力。离子交换配基为二乙氨乙基（diethylaminoethyl，DEAE），该配基在pH 3-12 的工作范围内仍然能够保持稳定的高蛋白结合能力。
与传统柱层析纯化方式相比，Magrose DEAE 磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理（如：反复繁琐的离心，费时费力的过滤操作），此外，无需控制流速及柱压，不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说，在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取，且能轻松实现多个样品的平行处理，实现高通量的蛋白纯化。

产品信息
产品名称：  Magrose DEAE
磁珠粒径范围：   30~150μm
离子交换类型：   弱阴离子基团
总离子能力：   110~170µmol/mL Gel
蛋白结合量：   ≥110mg BSA/mL Gel
保存液：   20% 乙醇
悬液浓度：   10%（V/V）磁珠悬液
保存温度：   2~30°C （长期保存，建议置于 2~8°C）
工作 pH 范围：   3-12
保质期：   在 2~8℃可稳定保存，保质期 2 年。
注：1. 蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值；
       2. 1mL 磁珠悬液中含有 100µL 磁珠。

产品优势
1. 磁响应速度快，减少操作时间
2. 磁珠具有良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性
3. 配基具有良好的物理化学稳定性，提高了实验结果的可靠性及可重复性

操作流程（以纯化含 BSA 蛋白样品为例）
1. 磁珠预处理（平衡）：将Magrose DEAE 磁珠漩涡振荡30 s，使磁珠充分重悬；取一定量的 10%（V/V）磁珠悬液置于 50mL 离心管中。对磁珠悬液进行磁性分离，弃上清液，加入 20mL 平衡缓冲液洗涤磁珠 3 次，每次垂直混合 2min。
注：为了获得目标蛋白的最大回收率，实验者需要加入过量的 Magrose DEAE 磁珠，一般大于蛋白结合量的 20%即可。对于含较低丰度目标蛋白的样品中，磁珠对目标蛋白的回收率会有所降低，因此需要继续
增大磁珠的用量；
2. 蛋白吸附：将预处理的磁珠加入含 BSA 蛋白的样品溶液中，漩涡振荡 30s，置于垂直混合仪混匀30~60min，使样品和磁珠充分接触并吸附，然后进行磁性分离，移弃上清液。
注：为了更有效率的吸附结合物质，平衡缓冲液最好含有较低的离子强度，选择的 pH 值应该至少与目标蛋白的等电点相差一个 pH 单位，选定的盐缓冲液 pH 波动在 0.5 pH 以内。目标蛋白与磁珠的吸附时间与蛋白的本身属性有关。

3. 磁珠洗涤：加入20mL 的平衡缓冲液，漩涡振荡重悬磁珠 30s 后进行磁性分离，移弃上清液；该操作重复 3 次。
4. 蛋白洗脱：在上述完成磁珠洗涤的离心管中加入适量的洗脱液进行蛋白洗脱。用移液器吹打或者涡旋振荡下迅速重悬，然后将离心管置于垂直混合仪混匀 10~15min 后进行磁性分离，收集上清液至新的离心管中。洗脱方式主要有高盐浓度洗脱（含1-2M 的NaCl 的平衡缓冲液）和低 pH 洗脱（选择低于目标蛋白等电点的 pH范围即可）两种。
5. 磁珠再生：一般采用2 M NaCl 溶液洗涤3~5 次，然后用平衡缓冲液进行再平衡处理。磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上，为了保证磁珠的使用效率，建议进行在位清洗（CIP）。
6. 在位清洗（CIP）：依次采用1.0M NaOH、70%乙醇或30%异丙醇、纯化水洗涤磁珠 2 次；最后加入20%乙醇重悬磁珠，置于 2~8℃保存。

注意事项
1. 本产品不宜冷冻、干燥或离心操作。冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散， 并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠 2~3 次，以去除保存液中乙醇。
4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
5. 盐浓度与pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱，客户需自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件，以保证蛋白纯化量和纯度。
6. 本产品仅供研究使用。