肝素磁珠(30-150μm) Magrose Heparin

产品简介
Magrose Heparin 磁珠具有快速的磁响应性、丰富的肝素密度、极高的物理化学稳定性等特点。一方面，可作为亲和层析的配基，能够与生长因子及抗凝血酶 AT Ⅲ等生物分子发生特异性结合；另一方面，由于表面带有大量负电性硫酸根离子基团，可作为一种阳离子交换介质，在一定pH条件下，与带正电的蛋白具有强的结合能力。
与传统柱层析纯化方式相比，Magrose Heparin 磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理（如：反复繁琐的离心，费时费力的过滤操作），此外，无需控制流速及柱压，不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说，在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取，且能轻松实现多个样品的平行处理，实现高通量的蛋白纯化。
适用于抗凝血因子 III、凝血因子、核酸结合蛋白、脂蛋白、干扰素、类固醇受体、凝血酶及类凝血酶等生物大分子的分离纯化。

产品信息
产品名称：   Magrose Heparin
磁珠粒径范围：   30~150μm
表面基团含量：   ~3mg Heparin/mL Gel
蛋白结合量 ：   2~3mg 抗凝血酶 Ⅲ /mL Gel
保存液：   20%乙醇
悬液浓度：   10%（V/V）磁珠悬液
保存温度：   2~30°C （长期保存，建议置于 2～8°C）
Binding Buffer：   50mM Tris-HCl, pH 8.0
Elution Buffer：   50mM Tris-HCl, 1~2M NaCl, pH 8.0
保质期：   2~8°C 可稳定保存，保质期 2 年
注：1. 蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值；
       2. 1mL 磁珠悬液中含有 100µL 磁珠。

产品优势
1. 丰富的结合位点，加强了与配体的特异性结合
2. 磁响应速度快，减少操作时间
3. 磁珠具有良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性
4. 配基具有良好的物理化学稳定性，提高了实验结果的可靠性及可重复性

操作流程（以纯化人血浆中抗凝血酶 Ⅲ为例）
1. 样品处理：取人血浆 1mL 加入至 1.5mL EP 管中，接着加入 500µL Binding Buffer，充分混匀。
2. 磁珠预处理：将 Magrose Heparin 磁珠漩涡振荡 30 s，使磁珠充分重悬；取 1mL 10%（V/V）磁珠悬液置于另一新的 1.5mL EP 管中。对磁珠悬液进行磁性分离，弃上清液，用 1mL Binding Buffer 洗涤 2 次，磁性分离，管中磁珠可直接用于抗体分离。
3. 蛋白吸附：在步骤 2 预处理的磁珠管中加入步骤 1 处理的样品溶液，漩涡振荡均匀，在室温下（约25°C）将 EP 管置于垂直混合仪混匀 15~30min，使样品和磁珠充分接触并吸附，然后进行磁性分离，
移弃上清液。
4. 磁珠洗涤：向 EP 管中加入 1mL Binding Buffer，漩涡振荡重悬磁珠 1min 后进行磁性分离，移弃上清液；该操作重复 3 次。
注意事项：根据对洗脱蛋白 SDS-PAGE 图谱，在 Binding Buffer 中可适当加入一定浓度 NaCl，该步骤可有效的去除非特异性吸附蛋白，使操作者获得更高浓度的目标蛋白。
5. 蛋白洗脱：在上述完成磁珠洗涤的 EP 管中加入 0.2mL Elution Buffer，用移液器吹打或者涡旋振荡下迅速重悬，然后在室温下（约 25°C）将 EP 管置于垂直混合仪混匀 10~15min 后进行磁性分离，收集
上清液至新的 EP 管。
6. 磁珠再生：向 EP 管中加入 1mL 纯化水，漩涡振荡重悬磁珠后进行磁性分离，移弃上清液，重复操作3 次；接着改用 Binding Buffer 洗涤磁珠 3 次。磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白
等杂质非特异性吸附到磁珠上，为了保证磁珠的使用效率，建议进行在位清洗（CIP）。
7. 在位清洗（CIP）：依次采用 0.1M NaOH、8 M 尿素、纯化水、Binding Bufdfer 洗涤磁珠 2 次；最后加入 1mL Storage Buffer(20%乙醇)重悬磁珠 ，置于 2~8°C 保存。

注意事项
1. 本产品不宜冷冻、干燥或离心操作。冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠 2~3 次，以去除保存液中乙醇。
4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
5. 盐浓度与 pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱，客户需自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件，以保证 蛋白纯化量和纯度。
6. 本产品仅供研究使用。