Fibronectin from Human Plasma

产品描述

纤连蛋白（Fibronectin, FN），也称为纤维连接蛋白，是一种广谱的、天然的细胞粘附因子。纤连蛋白是一种440-500kDa的二聚体糖蛋白，由两个相似的220-250kDa的亚基通过二硫键连接而成。主要以两种形式存在，可溶形式和不可溶形式，前者以二聚体形式存在血浆中，后者以多聚体形式存在于细胞外基质（ECM）和细胞表面。纤连蛋白首要功能与细胞粘附到细胞外基质有关，通过纤连蛋白上的序列Arg-Gly-Asp-Ser（RGDS）来识别细胞相关的跨膜整合素受体从而调控粘附。纤连蛋白的其他结构域也参与这一粘附过程，可能涉及与胶原蛋白、肝素和其他细胞表面粘多糖的相互作用。粘附后纤连蛋白的构象和方向也很重要，对细胞分布和内皮细胞粘附强度上发挥作用。经纤连蛋白包被的培养器皿用来培养BHK、CHO和其他细胞系呈现出更明显的粘附效应。可以说，纤连蛋白参与体内众多生理过程，比如细胞间的粘附和迁移、细胞骨架组装、酪氨酸磷酸化以及肿瘤转移。

本品是经亲和色谱纯化所得的人血浆来源纤连蛋白，以冻干粉形式提供，适用于细胞粘附和细胞铺展。

产品特性

1）CAS NO：86088-83-7
2）同义名：Fibronectin from Human Plasma；Human Plasma Fibronectin；Natural Human Fibronectin；Human Fibronectin；纤连蛋白，来源于人血浆；天然人纤连蛋白；人纤维连接蛋白；
3）分子量：440kDa（非还原形式）
4）外观：白色粉末
5）组成：100 mM CAPS，0.15M NaCl，1 mM CaCl2，pH 11.0
6）质量控制：1）4-12% SDS-PAGE凝胶电泳和考马斯亮蓝染色来验证蛋白。还原条件下，纯度≥90%；2）细胞粘附实验，表明纤连蛋白能够极好的促进BHK-21细胞的粘附和铺展；3）纤连蛋白经测试细菌、真菌和支原体阴性。

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，至少1年有效。 不可冻存。

运输：冰袋运输。

使用方法

一、 产品溶解和使用

将产品从冰箱取出置于室温平衡至少20min。按照1mg/ml浓度加入适量无菌蒸馏水重悬粉末，静置30min让粉末充分进入溶液。不可振动或涡旋。如果所有溶液不能立即用完，请按单次用量分装并置于-20℃冻存。建议2周内用完溶解产品。不要保存在无霜冰箱，避免多次反复冻融。

二、 产品应用

用于细胞培养包被基质的建议浓度为1-5μg/cm2，或用作培养基添加剂的建议浓度为5μg/ml。

三、 包被步骤

以下步骤作为参考，依据具体培养体系来确定最佳的包被浓度。

1） 用无血清，不含Ca2+，Mg2+的培养基或者缓冲液稀释纤连蛋白储存液到所需的工作浓度，以最小体积完全覆盖培养表面，推荐包被浓度为1-5μg/cm2。比如，若最终包被浓度为5μg/cm2，稀释储存液到50μg/ml，按照1ml/35mm培养皿，3ml/60mm培养皿等加量。

【注意】：由于纤连蛋白溶液中含CAPS，含有Ca2+，Mg2+的培养基添加到纤连蛋白中可能会引起不溶的金属氢氧化物产生。如果缓冲体系能将稀释液的pH调至8.0或更低，不会发生此情况。

2） 加适量稀释好的纤连蛋白到培养器皿表面。

3） 室温孵育1h。

4） 吸掉多余纤连蛋白溶液。

5） 用去离子水清洗，注意操作过程中不要刮破底层。

6） 此时的培养容器即可使用。或许以潮湿状态保存在2-8℃或无菌条件下风干。

注意事项

1） 如果操作不当，本品中的某些成分可能会导致健康风险。因此，操作本品时注意做好防护，包括穿好衣服和带上眼罩。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。