Fibronectin from Bovine Plasma

产品描述

纤连蛋白（Fibronectin, FN），也称为纤维连接蛋白，是一种广谱的、天然的细胞粘附因子。纤连蛋白是一种440-500kDa的二聚体糖蛋白，由两个相似的220-250kDa的亚基通过二硫键连接而成。主要以两种形式存在，可溶形式和不可溶形式，前者以二聚体形式存在血浆中，后者以多聚体形式存在于细胞外基质（ECM）和细胞表面。纤连蛋白首要功能与细胞粘附到细胞外基质有关，通过纤连蛋白上的序列Arg-Gly-Asp-Ser（RGDS）来识别细胞相关的跨膜整合素受体从而调控粘附。纤连蛋白的其他结构域也参与这一粘附过程，可能涉及与胶原蛋白、肝素和其他细胞表面粘多糖的相互作用。粘附后纤连蛋白的构象和方向也很重要，对细胞分布和内皮细胞粘附强度上发挥作用。经纤连蛋白包被的培养器皿用来培养BHK、CHO和其他细胞系呈现出更明显的粘附效应。可以说，纤连蛋白参与体内众多生理过程，比如细胞间的粘附和迁移、细胞骨架组装、酪氨酸磷酸化以及肿瘤转移。

本品是经亲和色谱纯化所得的牛血浆来源纤连蛋白，以无菌溶液形式提供，浓度为1mg/ml，适用于细胞粘附和细胞铺展。

产品特性

1）CAS NO：86088-83-7

2）同义名：Fibronectin from Bovine Plasma；Bovine Plasma Fibronectin；Natural Bovine Fibronectin；纤连蛋白，来源于牛血浆；天然牛纤连蛋白；牛纤维连接蛋白；

3）分子量：440-500kDa

4）外观：无菌溶液（1mg/ml）

5）储存缓冲液：0.15M NaCl，20 mM Tris，pH 7.5

6）质量控制：1）通过NuPAGE 4-12% Bis-Tris凝胶电泳和考马斯亮蓝染色来验证蛋白。还原条件下，纤连蛋白在胶上显示两条亮带（230 kDa，220 kDa）；2）ELISA检测显示吸附效率与纤连蛋白浓度的对数呈正比。3）细胞粘附实验表明，低至0.1μg/cm2纤连蛋白包被层能明显促进内皮细胞粘附，以非包被表面为对照。

保存与运输方法

保存：-80℃保存，1年有效。

运输：干冰运输。

使用方法

1）产品保存与处理细节

建议产品以单次用量分装后置于-80℃冻存。产品需要于37℃中缓慢融化，不可摇晃。对于瓶子不能溶解的物质可通过离心去除，不会影响产品性能。避免反复冻融。

2）产品应用

用于细胞培养包被基质（细胞培养下层）的建议浓度为1-5μg/cm2。最佳工作浓度取决于细胞类型。

3）包被步骤

1. 用不含Ca2+，Mg2+的PBS缓冲液稀释纤连蛋白原液，以最小体积完全覆盖培养表面，推荐包被浓度为1-5μg/cm2。

2. 于37℃培养箱或室温孵育至少2h。

3. 吸掉多余纤连蛋白溶液并用去离子水清洗，注意操作过程中不要刮破底层。

4. 此时的培养容器即可使用。

注意事项

1）如果操作不当，本品中的某些成分可能会导致健康风险。因此，操作本品时注意做好防护，包括穿好衣服和带上眼罩。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。