OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒 | NEB

品牌	货号	产品中文名称	产品英文名称
NEB	E5315	OneTaq®一步法 RT-PCR 试剂盒	OneTaq®One-Step RT-PCR Kit

货号	产品中文名称	产品英文名称	规格
E5315S	OneTaq® 一步法 RT-PCR 试剂盒	OneTaq® One-Step RT-PCR Kit	30 rxns

产品特点

Easy and efficient One-Step RT-PCR

• Optimized reaction mix for cDNA synthesis and PCR amplification in one step
• Hot start formulation eliminates nonspecific amplification and does not require a separate activation step
• Offered with Quick-Load^® dyes for sample tracking and direct loading of PCR products onto gels

OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒为终点检测 RNA 提供了高效、灵敏的检测方法。使用基因特异性的引物将 cDNA 合成和 PCR 反应放在单管中完成，大大简化 RT-PCR 操作步骤。
该试剂盒包含三种优化的混合液：OneTaq 一步法酶混合液、OneTaq 一步法反应混合液和 OneTaq 一步法 Quick-Load 反应混合液。酶混合液包含 ProtoScript II 反转录酶、小鼠 RNase 抑制剂和 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶。ProtoScript II 反转录酶是 M-MuLV 反转录酶的突变体，其降低了 RNase H 活性且提高了热稳定性。OneTaq 热启动 DNA 聚合酶是热启动 Taq DNA 聚合酶和一个有校读功能的 DNA 聚合酶的混合液，无需优化就可得到高产量扩增产物。 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒最长扩增长度达 9 kb。
试剂盒配有两种优化的反应混合液：OneTaq 一步法反应混合液和 OneTaq 一步法 Quick-Load 反应混合液。反应混合液为 cDNA 合成和 PCR 扩增提供稳定的反应条件。独特的 OneTaq 一步法 Quick-Load 反应混合液包含染料，不仅在建立反应时起到指示作用，还可直接凝胶上样。
总 RNA 和 mRNA 均可作为模板。该试剂盒单次反应能检测到低至 0.1 pg 的 GAPDH 基因。检测靶 RNA 长达 9 kb。OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒 一次可对 2 至 3 个靶基因进行多重检测。
图 1：检测不同长度的 RNA 模板。
按照标准操作流程，在 50 μl 反应体系中加入约 100 ng 来源于 Jurkat 细胞总 RNA。目标序列大小为泳道 1：0.7 kb，泳道 2：1.1 kb，泳道 3：1.9 kb，泳道 4：2.3 kb，泳道 5：2.5 kb，泳道 6：5.5 kb，泳道 7：7.6 kb，泳道 8：9.3 kb。Marker（M）为 Quick-Load 1 kb Plus DNA Ladder（NEB #N0469）。图 2：可灵敏检测低至 1 pg 的 RNA。
按照标准操作流程，在 50 μl 反应体系中加入梯度稀释的来源于 HeLa 细胞总 RNA（泳道 1：1 μg，泳道 2：100 ng，泳道 3：10 ng，泳道 4：1 ng，泳道 5：100 pg，泳道 6：10 pg，泳道 7：1 pg，泳道 8：0.1 pg）。Marker（M）为 Quick-Load 1 kb Plus DNA Ladder（NEB #N0469）。

产品类别:

RT-PCR 产品,

cDNA 合成和反转录酶产品

应用:

RT-PCR,

RT-PCR & cDNA Synthesis,

PCR

备注：以上仅为 E5315 的部分产品信息，如需NEB货号 E5315 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。