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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | S6651 | 几丁质树脂 | Chitin Resin |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| S6651L | 几丁质树脂 | Chitin Resin | 100 ml |
| S6651S | 几丁质树脂 | Chitin Resin | 20 ml |
| S6651V | 几丁质树脂 | Chitin Resin | 10 ml |
产品特点
An affinity matrix for the isolation of target proteins fused to an intein-chitin binding domain fusion
- Strong specific binding for CBD-fusion protein affords highly pure protein of interest from crude lysate in one step
- Removal of CBD-tag during elution typically yields highly pure, native protein without the use of a protease
- This resin, when used with pTXB1, allows for the isolation of native recombinant proteins possessing a reactive C-terminal thioester that can be used for applications in intein-mediated protein ligation (IPL) and site-specific labeling
- Binding capacity: 2 mg maltose-binding protein/mL bed volume released from the resin after cleavage of the maltose-binding-CBD-fusion protein
- Resin may be regenerated up to 5 times
本产品是一种亲和基质,用于分离与内含肽-几丁质结合域融合表达的目标蛋白(1)
IMPACT 引用文献
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- 产品类别:
- IMPACT 系统,
- E. coli 细菌蛋白表达产品,
- Chitin Purification (CBD-tag),
- Affinity Purification,
- 蛋白纯化, 蛋白表达产品
- 应用:
- Affinity Purification & Expression Tags,
- Protein Purification,
- IMPACT Affinity Tag
备注:以上仅为 S6651 的部分产品信息,如需NEB货号 S6651 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验结合蛋白域―intein1―MCS,不用分2个载体;而且做过克隆的人会很有体会:很多时候双酶切载体,由于2个酶切位点都多克隆位点上,没有小片断切下来,所以是否成功双酶切就不好判断,如果用Twin载体就会切下一个片断,更方便判断.pTWIN 最巧妙的不仅于此,更重要的是还可以将目的基因直接克隆到MCS位点上,得到两端都带有intein和CBD的融合蛋白――内含肽融合在目的蛋白的C- 端,目的蛋白依赖巯基纯化从几丁质树脂上释放下来.这种依赖巯基的切割会使纯化的蛋白C-端带有一个巯基,可以用于内含肽介导
,更方便判断。pTWIN最巧妙的不仅于此,更重要的是还可以将目的基因直接克隆到MCS位点上,得到两端都带有intein和CBD的融合蛋白――内含肽融合在目的蛋白的C-端,目的蛋白依赖巯基纯化从几丁质树脂上释放下来。这种依赖巯基的切割会使纯化的蛋白C-端带有一个巯基,可以用于内含肽介导的蛋白连接(IPL)反应。IPL连接反应可用于将荧光,生物素和/或非编码氨基酸序列连接到原核表达的蛋白质的C-端。另外,目的蛋白N-端与内含肽融合体可以通过改变pH或者温度使目的蛋白从几丁质树脂上释放下来。这种方法适用
IMPACT™-TWIN 蛋白纯化系统,可以不用任何蛋白酶,表达N-Cys的蛋白,一步过柱纯化。
IMPACT™-TWIN 蛋白纯化系统 (蛋白单柱亲和纯化、标记及连接) E6950S pdf下载 概述: NEB在世界上最早开展内含肽(intein)技术的开发(1)。IMPACTTM 系统是一种新型的蛋白融合表达及纯化系统,能应用到蛋白质工程的许多重要领域(1-11)。IMPACTTM 表达的目的蛋白与蛋白自剪接元件(称为"内含肽",intein)及几丁质结合蛋白形成融合蛋白, 通过几丁质柱亲和纯化融合蛋白。然后诱导内含肽的肽键裂解活性,在几丁质介质上将目标蛋白释放
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