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- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | S1427 | NEBExpress® 镍离心柱 | NEBExpress®Ni Spin Columns |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| S1427L | NEBExpress® 镍离心柱 | NEBExpress Ni Spin Columns | 25 each |
| S1427S | NEBExpress® 镍离心柱 | NEBExpress Ni Spin Columns | 10 each |
产品特点
- Includes ready-to-use pre-packed Ni spin columns and all required buffers for purification
- Purification of ≥1 mg His-tagged protein per column in as little as 15 minutes
- High specific binding of His-tagged proteins yielding purities of >95%
- Strong nickel ion binding provides excellent resistance to EDTA and reducing agents. Compatible with commercially available detergent-based cell lysis reagents
- Isolation and purification of His-tagged fusion proteins under native or denaturing conditions
Spin columns containing an affinity matrix for the small-scale isolation and purification of polyhistidine-tagged (His-tagged) fusion proteins. Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) purifications employing NEBExpress® Ni Spin columns can be performed under native or denaturing conditions, yielding highly pure target in a single protein purification step. This enables screening of expression conditions and streamlines the functional and structural characterization of the target protein.
Support Matrix: Spherical, agarose based microparticles ranging in size from 10-100 μm.
备注:以上仅为 S1427 的部分产品信息,如需NEB货号 S1427 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验螯合树脂 用于分离 6XHis 标签重组蛋白,高度结合效率和低的非特异性结合。 固定的金属亲和层析树脂(IMAC)使用镍离子来纯化 6XHis 标签蛋白。树脂可以结合 6X 组氨酸残基(6XHis),一种在蛋白纯化中非常常用的标签。树脂由氨基二乙酸偶联到 6% 交联的琼脂糖上组成。氨基二乙酸可以共价结合到镍离子上,每毫升树脂可以结合 20-40μmoles 镍离子。 这种镍螯合树脂有单独的树脂也有离心柱形式供选择。 特定的结合和洗脱缓冲液液可以提供, 100 ml His 结合
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的方法是:用平末端克隆法将片段插入已去磷酸化的载体上,(或使用NEB平端克隆试剂盒 #E0103)。插入片段的5"末端应磷酸化,除非在引物合成时,引物的5"末端已有磷酸基。 PCR产物是否能在PCR反应体系中直接磷酸化? 不能,因为PCR反应中的硫酸胺会抑制T4多聚核苷酸激酶活性。可采用胶回收或G25离心柱法来纯化DNA。在50 μl反应体系,加入1×T4 Polynucleotide Kinase Buffer、1 mM ATP 和 小于200 pmol的5"羟基末端
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