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随着我国老龄化社会的形成,心脑血管疾患逐渐成为严重影响人们生命健康的最主要疾病。心肌缺血将导致心肌细胞不可逆性坏死,被称为心肌梗死。作为终末分化细胞,大面积心肌细胞梗死将导致严重心脏功能不全危及患者生命及时恢复缺血心肌组织的血液灌注一“再灌注”是治疗急性心肌梗死有效的方法。然而,当缺血心肌再次获得血液灌注后将导致比同时间单纯缺血更加严重的心肌损害,这一矛盾的现象被称为再灌注损伤。心肌缺血再灌注损伤是心肌梗死PCI治疗以及心脏手术后心功能不全的主要病理生理基础上。
一、动物的选择
大鼠品系:SD、Wistar;
小鼠品系:C57BL/6、BALB/C;以及其他品系;周龄:6-8周;性别不限。
二、造模方法
1、准备实验所需手术器材:10%水合,1ml注射器,碘伏,棉棒,电推子,手术板,4根皮筋,剪刀,大眼科弯镊2把,持针器1把,止血钳1把,6-0带针缝合线,3-0缝合线,缝合针,电子秤,呼吸机。
2、选择状态较好的SD大鼠,雄性,220-250g,称重醉后仰卧用皮筋固定手术板上。胸骨左侧剃毛,剃毛处擦碘伏消毒。胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米,钝性分离皮下肌肉,在分离三和四肋间暴露出胸膜。
3、胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米,钝性分离皮下肌肉,在分离三和四肋间暴露出胸膜。用镊子撕开胸膜进入胸腔,用止血钳撑开肋骨,暴露出心脏。
4、用镊子轻轻撕破心膜,用止血钳轻轻把心脏夹出(操作过程中不要碰到肺)。用6-0缝合线结扎,(结扎位置与左心耳尖平行处)轻轻将心脏放回胸腔
5 、观察心脏里面有无出血。无出血后用3-0缝合线逐层缝合,缝合结束后擦拭碘伏消毒,然后拔出呼吸机,将大鼠放回笼内。
6、如果需要做缺血再灌注模型时,再第4步结扎时加入特制线栓,缺血相应时间后拔去线栓,制成心肌缺血再灌注模型。
三、模型验证
1、肉眼观察
结扎成功后肉眼见左心室前壁变青紫或苍白,搏动减弱,心电图呈示 ST 段抬高为心肌缺血造模成功标志。
2、心电图测试
心肌缺血成功标志:心电图表现ST段抬高和(或)T波高尖或倒置呈弓背向上抬高,各种心律失常。
再灌注成功标志:再灌注后,抬高的ST段下降>50%,或高尖的T波下降。且再灌注初起时虽出现心律失常、室速、室颤等情况,但之后心率异常逐渐消失,心率逐渐趋于平稳且维持数小时,提示心肌再灌注模型成功。
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文献和实验心肌缺血再灌注模型: 心肌缺血是指心脏血液灌注减少,导致心脏供氧减少,心肌能量代谢不正常,不能支持心脏正常工作的一种病理状态。冠心病是临床常见的缺血性心脏病,是指冠状动脉发生粥样硬化引起管腔狭窄或闭塞,导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病,临床以血运重建治疗为主。然而,目前大量研究结果显示,缺血心肌组织恢复血流供应后,心肌受损程度仍可能进一步加重,对心肌造成二次损害,缺血再灌注(I/R)损伤心肌可占全部梗死心肌面积的50%。1960年Jennings等首次提出
【实验目的】 1. 学习复制整体动物心肌缺血再灌注损伤模型的制备方法。 2. 观察缺血再灌注时心律失常的表现及心功能指标的改变。 3. 了解心肌缺血再灌注损伤的救治原则。 【实验原理】 心肌缺血可导致心肌的缺血性损伤,而在一定时间后恢复血液供应,常可加重原有的缺血性心肌损伤,即再灌注损伤。对麻醉动物行左冠状动脉前降支结扎术和松解术后,由于左侧主要的冠状动脉闭塞和再通,引起左侧心室肌发生明显的心肌缺血再灌注损伤。缺血再灌注时,心肌氧
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