小型猪心肌缺血再灌注模型

一、小型猪心肌缺血再灌注制备方法

(一)实验动物  小型猪，体重(25±5)kg，雌雄不拘。

（二）小型猪急性心肌梗死后无复流模型制作

1．术前准备及麻醉

所有实验小型猪，术前禁食12小时，禁饮4小时，术前洗浴，麻醉，将小型猪移至导管床上，行气管插管，取仰卧位，固定。胸部、腹股沟区及四肢用去毛后，用针电极连接胸部及四肢导联，记录术前心电图、手术过程中同步心电、血压监测。

2．穿刺

麻醉成功后，常规消毒、铺巾，麻醉深达腹股沟韧带下水平。

3．Swan-Ganz漂浮导管置入  

在体外试充盈导管气囊无误后，连接远端压力监测(肺动脉压)接口，在压力波形及透视指导下送入Swan-Ganz漂浮导管，在右心房部位开始充盈气囊，继续送入导管至肺小动脉并形成嵌顿，记录到PCWP，相当于左心室舒张末期压(LVEDP)。释放气囊，实时监测肺动脉压。然后利用温度稀释法测量心排出量(CO)。

4．有创压力监测、记录 

通过Swan-Ganz漂浮导管接有创压力监护系统监测肺动脉压(PAP)和肺动脉楔压(PCWP)；将股动脉鞘管侧臂连接有创压力监护系统，连续实时监测股动脉压力。

5．左心室造影  

采用133cm亲水导丝将4F猪尾导管导入左心室，连接高压注射器，采取右前斜位30°，造影剂速度10ml/s，行左心室造影。造影结束后，记录基础情况下的左心室压力曲线，计算舒张末期压力(LVEDP)、收缩末期压力(LVESP)、dp/dt等。记录完毕后撤出导丝和猪尾导管。

6．冠状动脉造影(CAG)  

沿动脉鞘管插入带超滑导丝的4F Judkins右冠状动脉造影管，超滑导丝插入达主动脉根部(冠状动脉窦底)，并使之部分反折，然后沿导丝送入造影导管达主动脉根部，头端指向左后方的左冠状动脉开口，然后固定造影导管不动，将导丝轻退至造影导管内约10cm，可见造影导管自行弹入左冠状动脉开口，其标志是导管头端位置固定，且随心脏搏动而搏动

7．指引导管超选择左前降支中段

6F指引导管沿超滑导丝置于左冠开口，更换0.014英寸HiTorque Floppy Ⅱ型导引导丝进入左前降支。依具体情况，一般先选择左前斜加足位，确认导丝进入左前降支。然后改后前位加头位，使导丝进入左前降支远端。再沿导丝导入指引导管到达前降支中段。

8．缺血再灌注

根据左前降支直径选择相应大小球囊，持续闭塞左前降支近段1/3处约45分钟，抽瘪并撤出球囊，恢复血流灌注。

二、模型评价

1.心电图

2.SPECT ：SPECT心肌灌注结果：心尖、前臂心尖段、间隔心尖段、侧壁心尖段、前壁中段和基底段，以及前间隔中段和基底段不同程度的血流灌注受损。
3.心脏超声
4.冠脉造影 
5.大动物组织病理（全心大样本切片）：模型组心肌间可见局灶性炎细胞浸润(以淋巴细胞和中性粒细胞为主)，并伴随心肌外膜炎细胞浸润(以中性粒细胞为主)，心肌细胞空泡变性、水肿，部分切片可见心腔内有血栓形成。

检测平台

服务项目	服务承诺	服务周期	样本种类
病理切片、免疫组化	染色结果照片	2-3周	组织
Western blotting	胶片	1-2周	蛋白样本或组织
流式细胞服务	散点图、分析数据、设备信息等	1-2周	血样、骨髓等
细胞凋亡检测	凋亡图、数据分析		细胞
RT-PCR	扩增图	1-2周	RNA或组织
血压监测（无创式）	实时血压数据		大、小鼠

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