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- 福建厦门
- 2026年01月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
原核表达纯化预实验
- 规格：
蛋白/100ml
| 规格： | 蛋白 | 产品价格： | ￥3000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100ml | 产品价格： | ￥1500.0 |
载体构建，表达和纯化条件优化
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文献和实验【专题讨论】一个蛋白原核表达纯化出现的问题,高手们请进来讨论下.
最近很郁闷,非常郁闷!!!明天就要去考博了,现在实验出现这种奇怪的事,郁闷啊!大家别急,我详细的说说我遇到的问题. 一直在表达纯化蛋白.一共两种,都是一起做的.其中有一个没什么问题,顺顺利利.没什么好说的.现在说说另一个.这个问题蛋白呢,基因是我们实验室自己克隆的,genebank登录号AF188239.338个氨基酸.预测有两个跨膜域.其中这个蛋白有19个半胱氨酸残基!!!!!!(这是我后面发现有问题,自己一个一个去对发现有很多半胱氨酸残基.) 好了,开始做诱导.pet-28b载体,bl
原核表达蛋白纯化② 真核表达蛋白抽提2. 体系孵育与 pull-down3. 考染检测与 WB 验证四、GST pull-down 结果1. GST pull-down 结果分析① 考马斯亮蓝检测② Western blot 验证五、GST pull-down 拓展1. GST pull-down 与 Co-IP 区别① GST pull-down② Co-IPGST pull-down 与 Co-IP 区别：GST pull-down 是原核纯化蛋白与真核蛋白在试管内发生生化反应互作的结果
huaxiflame05 各位，我的实验最近遇到了问题，检测一个趋化因子，Western 重复性很差，只有蛋白上样量接近200ug的时候才能勉勉强强看到很弱的条带，并且杂带很多。师兄建议让公司合成纯化蛋白。但问题是原核表达的蛋白分子量35kDa，在真核系统里，这个蛋白质高度糖基化，分子量可达到60kD。在这种情况下，如何构建阳性对照呢？ ***解答 magichunter 换成单克隆抗体应该特异性更好
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