ELISA实验

ELISA检测样本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,灵敏度*。
◆注意事项:
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在49C备用,如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后,将标本及时分装后放在20℃或70°C条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。
ELISA检测液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右( 2000-3000转1分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA.柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右( 200-3000转1分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右( 2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水.
脑脊液参照此实行。
细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右( 200-3000转1分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS ( PH7.2-7.4 )稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右( 2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS , PH7.4。用液氬迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8*C的温度。加入一定量的PBS (PH7.4) , 用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右( 2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。