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广州艾迪基因科技有限责任公司
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文献和实验)在再生医学中的应用前景广阔。然而,必须通过移植特定细胞类型的同源群体确保 hPSC 衍生物的安全性。采用常规方法纯化从胚胎或诱导的多能干细胞产生的祖细胞和成熟细胞仍然具有挑战性,而 IDLV-GFP 报告系统可以解决这一难题: 作者构建IDLV表达肝脏特异性载脂蛋白A-II(APOA-II)启动子驱动绿色荧光蛋白,感染由人胚胎干细胞系分化的肝祖细胞进行分选,获得了富含肝祖细胞的细胞群3。 载体构建示意图 FACS 及标志物鉴定 (A)纯化肝祖细胞的方案的流程图。 (B)IDLV-APOA-II
静脉注射,病毒注射总量为 1×10^11 vg/小鼠。Luc 的表达由 cTnT 启动子控制。(DOI: 10.1038/gt.2010.105) 图 4. 五种 AAV 血清型在小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为左心室前壁注射,病毒注射总量为 5×10^10 vg/小鼠,体积为 10μL。Luc 的表达由 cTnT 启 动子控制。(DOI:10.1002/jgm.1576) 图 5. 五种 AAV 血清型以不同剂量注射至小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为颈静脉注射。EGFP
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶?成像和定量根本不是一回事
光毒,而且生物体内基本没有内源荧光素酶,背景极低、灵敏度极高,适合定量和体内成像;缺点是只能给一个总酶活性数字,看不到空间分布。 EGFP 关键参数:激发波长 488 nm、发射波长 507 nm;mCherry 激发 587 nm、发射 610 nm;ZsGreen1 与 EGFP 同属绿光,激发 488、发射 507。选不同颜色主要是为了多标不串色。 为什么这一点值得单独说 EGFP和Luc解决的是两类问题。 EGFP更适合“看在哪里、多少细胞”,荧光素酶更适合“定量变化、低背景检测”。如果既要定位
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