哺乳动物组织通用解离试剂盒

产品简介: 

品牌：bestopcell/百奥益康  

货号：BA3303 

产品名称：哺乳动物组织通用解离试剂盒 

产品规格：10 rxns 

品牌介绍: 

  北京百奥益康医药科技有限公司是一家专注单细胞分子检测创新技术及临床转化应用的国家高新技术企业，由中国科学院科学家、海归科学家、临床专家、国内知名高通量检测资深研发专家联合创立，核心团队在单细胞分子检测领域深耕近10年，在单细胞分子检测技术创新、大数据智能分析与临床转化方面具有丰富经验。 

 

在高通量单细胞测序实验中，制备出高质量的单细胞悬液是实验成功的关键，百奥益康团队累积了10,000+个样本的单细胞测序服务经验，涉及150+种不同类型的组织，具有丰富的新鲜组织解离的经验。在此基础上，百奥益康自主研发了哺乳动物组织通用解离试剂盒，利用该试剂盒，可对常见的组织类型高效的制备出高质量的单细胞悬液。

 

产品优势

 

适用范围广：适用于哺乳动物各类普通组织单细胞悬液制备，如：胃、肠、乳腺、卵巢、输卵管、子宫、睾丸、附睾、垂体、甲状腺、胸腺、食管、鼻组织、黏膜、骨膜、淋巴组织、胚胎组织、软角等新鲜组织样本。

操作便捷：实验操作简单便捷，不需要特别的解离仪器，可轻松实现各类组织的解离，制备出高质量的单细胞悬液。

活性较高：利用该试剂盒制备的单细胞悬液活性较高，结团率较低。

测试效果
我们对新鲜的人某腺体组织、小鼠胸腺组织、小鼠滑膜组织以及某哺乳动物卵巢组织进行了实验，结果显示利用哺乳动物组织通用解离试剂盒解离后获得的细胞悬液质量较好，能满足单细胞转录组测序实验。

 

测试流程：

 

 

测试结果：
不同组织利用解离试剂盒制备的单细胞悬液质检结果

 

 

 

 

项目实测

目前我们已完成大量用该解离试剂盒处理的样本的单细胞测序项目，涉及的组织类型数十种！

 

部分项目实测不同类型组织解离后数据表现

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

不同组织解离后单细胞测序数据结果

注：数据均经对应项目的客户同意后发布

 

产品FAQ

1.    Q：这款试剂盒适用于所有哺乳动物组织吗？是否有明确不适用的组织类型？

A：试剂盒适用于哺乳动物多种常见组织，包括肝脏、肺、胃、肠、肾、肿瘤组织、乳腺、卵巢等 20 余种组织（如说明书所列），但暂不建议用于钙化程度极高的组织（如成熟骨组织）或脂肪含量过高的组织（如大网膜脂肪组织）。这类组织的特殊结构可能导致解离液无法充分作用，难以获得高质量单细胞悬液，若需处理此类组织，建议选择专用解离试剂盒。

 

2.    Q：试剂盒组分中的哺乳动物组织通用解离液（BA3303-A）为 2×1.25 mL，10 rxns 代表可进行 10 次实验，每次实验需使用多少体积的解离液？

A：每次实验需使用 240 μL 的哺乳动物组织通用解离液。按说明书步骤 1，每次实验需取 1 管 5 mL 离心管，加入 240 μL 解离液与 2760 μL RPMI 1640 培养基混合，2×1.25 mL（共 2.5 mL）解离液总量可满足约 10 次实验（2.5 mL=2500 μL，2500 μL÷240 μL / 次≈10.4 次），因操作中存在少量损耗，故标注为 10 rxns，如需扩大或者缩小，按比例调整。

 

3.    Q：消化过程中，水浴锅和杂交炉的使用有何差异？选择哪种设备更优？

A：两者核心差异在于混匀方式：使用水浴锅时需每隔 3-5 分钟手动摇晃离心管，确保组织与解离液充分接触；使用杂交炉时可设置 20-30 转 / 分钟的转速，实现自动混匀，减少手动操作误差。选择上无绝对 “更优”，需结合实验条件：若实验样本量多、人员操作时间紧张，杂交炉的自动混匀更高效，且能避免手动摇晃力度不均导致的消化差异；若样本量少，水浴锅手动操作即可满足需求，两种设备均需维持 37℃恒温。

 

4.    Q：说明书提到 “不同类型、状态的组织消化时间不同，需每隔一定时间质检”，具体应间隔多久质检？质检的核心指标是什么？

A：建议首次质检在消化 15分钟时进行，之后每隔 20-30 分钟质检一次。质检核心指标包括两点：一是细胞活性；二是细胞分散度，取少量悬液镜检，观察是否存在明显组织块（若组织块占比明显，可适当延长消化时间，但需同步监测活性，避免过度消化）。

 

5.    Q：步骤 5-7 中，消化后需用 70 μm 细胞筛过滤并清洗离心管 3 次，若省略 1-2 次清洗步骤，会对实验结果产生影响吗？

A：会显著影响结果。省略清洗步骤会导致残留的解离液、组织碎片及死细胞无法彻底去除：一方面，残留解离液可能继续破坏后续细胞活性，尤其对后续细胞培养或单细胞测序的细胞状态影响较大；另一方面，杂质残留会干扰细胞计数仪的质控结果，导致细胞浓度计算不准确。因此必须严格执行 3 次清洗，确保共收集 12 mL 滤液，充分去除杂质。

 

6.    Q：步骤 9 和 10 提到用含 5% FBS 的 PBS 清洗沉淀两次，FBS 的作用是什么？能否用不含 FBS 的 PBS 替代？

A：FBS（胎牛血清）的核心作用是中和残留的解离液活性，防止解离液持续损伤细胞，同时为细胞提供基础营养，维持细胞活性。不能用不含 FBS 的 PBS 替代，若使用无 FBS 的 PBS，残留解离液会继续破坏细胞膜，导致后续细胞活性大幅下降，尤其对需进行细胞培养或单细胞测序的样本，可能直接导致实验失败。

 

7.    Q：说明书备注 “DMEM 培养基可替代 RPMI 1640 培养基”，两者在成分上有差异，替代后是否需要调整实验步骤或试剂用量？

A：无需调整实验步骤和试剂用量。DMEM 与 RPMI 1640 培养基均为哺乳动物细胞常用基础培养基，虽在氨基酸、维生素等成分含量上有细微差异，但均能为组织解离提供适宜的渗透压和 pH 环境，满足解离液的作用条件。替代时直接按原用量（2760 μL / 次）添加即可，对解离效果和细胞活性无显著影响。

 

8.    Q：若需去除红细胞，需使用红细胞裂解试剂盒（货号 BA3311），应在哪个步骤加入该试剂盒进行操作？具体需注意什么？

A：建议在步骤 10 之后、步骤 11 之前进行红细胞去除操作。具体流程为：步骤 10 完成两次 PBS 清洗并弃上清后，加入红细胞裂解试剂盒的裂解液（按该试剂盒说明书用量）。

 

9.    Q：试剂盒保存条件为 - 20℃，若运输过程中或实验前不慎解冻（如在室温下放置 1 小时），解冻后的解离液能否继续使用？

A：若仅短暂解冻（室温 1 小时内，且未反复冻融），解冻后立即混匀并放回 - 20℃保存，可继续使用；若解冻时间超过 2 小时，或出现反复冻融（解冻后又冷冻，再解冻），则不可使用。因解离液中的酶活性对温度敏感，长时间室温放置或反复冻融会导致酶活性下降，解离效率降低，可能出现组织消化不充分的情况；若已解冻并使用，需通过缩短质检间隔、密切监测细胞活性来评估解离效果。

 

10.    Q：步骤 13 “质控结束后请立即进行后续实验”，若无法立即开展后续实验，制备好的单细胞悬液可短期保存吗？保存条件是什么？

A：可短期保存，但保存时间不超过 1小时，保存条件为 4℃冰箱，且需避免反复摇晃。保存时需将细胞悬液用含 5% FBS 的 PBS 调整至适宜浓度（1×10⁶-1×10⁷个 /mL），置于无菌低吸附离心管中密封。需注意：保存时间超过 1小时会导致细胞活性逐渐下降，尤其对单细胞测序样本，可能影响后续基因表达检测结果；若保存后需使用，需重新进行细胞活性质检，并轻轻吹打混匀，避免细胞沉淀。

产品与服务

订购须知: 

1）所有产品仅可用于科研目的的生物学实验（forresearchuseonly），严禁用于人体或动物的医疗目的