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- ZK-Bioscience
- ZK-0024387
- 中国/美国/德国/欧洲
- 2025年11月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
StarScript II First-strand cDNA Synthesis Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃恒温保存，保质期一年
- 规格：
20 rxn/50 rxn
【产品概述】
本产品是专为两步法RT-PCR第一步实验设计的高灵敏度RT-PCR反应系统，可以从极低量的总RNA或poly(A) mRNA合成第一链cDNA，并能够通读GC含量高、二级结构复杂的RNA模板。该试剂盒使用重组表达的StarScript II M-MuLV Reverse Transcriptase (RTase)，通过多点定点突变去除了RNase H的活性 (RNase H－)，并增加了该酶与模板－引物之间的亲和力，具有更好的热稳定性，因此其DNA聚合酶的活性和持续合成能力均高于野生型的M-MuLV RTase，合成的cDNA产量更高，长度可达15 kb。本试剂盒含有第一链cDNA合成所需的全部试剂，使用方便，对后续的PCR或定量PCR实验兼容性好，适合于各种耐热DNA聚合酶。
【产品组分】
| ZK212-02 | ZK212-05 | |
| StarScript II RTase (200 U/μl) | 20 μl | 50 μl |
| 5×RTase buffer* | 120 μl | 300 μl |
| 0.1M DTT | 60 μl | 150 μl |
| RNase Inhibitor | 12 μl | 30 μl |
| Oligo (dT)18(50 μM) | 20 μl | 50 μl |
| Random Primer (50 μM) | 20 μl | 50 μl |
| 10 mM dNTP Mix | 30 μl | 75 μl |
| DEPC-ddH2O | 1 μl | 2.5 ml |
* 5×RTase buffer：250 mM Tris-HCl (pH 8.3), 375 mM KCl, 15 mM MgCl2
【保存条件】
-20℃恒温保存，保质期一年
【活性定义】
以poly(rA)为模板，oligo(dT)为引物，在37℃条件下，10分钟内催化1 nmol 的dTTP所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
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文献和实验cDNA synthesis using superscript II
SuperScript II 1 µl water 4 µl Prepare this mix as a master mix and add then 20 µl to each reaction. Synthesize the cDNA in a thermocycler: 1.
Protocol for First-strand cDNA Synthesis
℃for 10 minutes and then at 37℃for 60 minutes.Stop the reaction by heating at 70℃for 10 minutes. Chill on ice.NoteThe synthesized cDNA can be amplified by the PCR (see Protocols for PCR using Taq and Pfu DNA Polymerases) without intermediate phenol
of mRNA) or random hexamers; the kit used here contains both kinds); nucleotides for DNA synthesis (dNTPs); MgC2 and buffers required by the enzyme, which are all present in the 5x Reaction Mix. Materials * iScript cDNA Synthesis Kit (BIORAD
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