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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Robust First Strand cDNA Synthesis Kit
- 保质期:
二年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50rxn/100rxn
产品概述
本产品基于PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase,包含合成高质量第一链cDNA所需的所有成分,适合于后续的PCR、qPCR以及PCR克隆。5× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系和dNTPs;PreScript Ⅲ Enzyme Mix包含PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase和RNase inhibitor。同时可根据需要,选择Oligo (dT)23VN、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase是通过定点突变得到的RNase H活性缺失的全新逆转录酶,该酶的热稳定性和cDNA合成效率得到大幅提升,适用于具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。
产品内容
| 组分 | ZY413A | ZY413B |
| 5× RT Reaction Mix | 200 μL | 400 μL |
| PreScript Ⅲ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
| Oligo (dT )23VN(50 μM) | 50 μL | 100 μL |
| Random hexamers(50 ng/μL) | 50 μL | 100 μL |
| RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
产品优势
高度热稳定性和cDNA合成效率:PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase具有极高的热稳定性和cDNA合成效率,适用于具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录
模板兼容性广:兼容不同物种及完整度较差的Total RNA
应用范围广:可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以及Specific Primer的各种逆转录情况
实验案例
1. 不同长度RNA模板的逆转录能力
以1 μg HeLa细胞Total RNA为模板,Oligo(dT) 23 VN为引物按照说明书体系和程序进行逆转录,取1 μL cDNA产物模板,用PfuMax HiFi DNA Polymerase进行扩增,可见R413产品可完整逆转录长达15 kb的RNA模板。
2. 与同类产品逆转录效率的比较
以1 μg HeLa细胞RNA为模板,使用R413产品和市售其他公司同类产品,按照各自说明书推荐体系和程序进行逆转录反应。以逆转录得到cDNA为模板,挑选高表达量和较低表达量两种基因,进行Realtime PCR检测这两种基因,结果显示(左图为高表达量基因检测结果,右图为较低表达量基因检测结果),R413产品的逆转录效率优于其他公司同类产品。
应用范围
高质量第一链 cDNA的合成,复杂RNA模板的逆转录, PCR、qPCR以及PCR克隆;用于较长的cDNA合成以及全长cDNA 文库的构建等。
产品存储
-20℃保存
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文献和实验Protocol for First-strand cDNA Synthesis
℃for 10 minutes and then at 37℃for 60 minutes.Stop the reaction by heating at 70℃for 10 minutes. Chill on ice.NoteThe synthesized cDNA can be amplified by the PCR (see Protocols for PCR using Taq and Pfu DNA Polymerases) without intermediate phenol
of mRNA) or random hexamers; the kit used here contains both kinds); nucleotides for DNA synthesis (dNTPs); MgC2 and buffers required by the enzyme, which are all present in the 5x Reaction Mix. Materials * iScript cDNA Synthesis Kit (BIORAD
methylation analysis, PCR, and multiplex PCR. The purified total RNA is ready to use in any application, such as RT-PCR, real-time RT-PCR, differential display, cDNA synthesis, Northern, dot, and slot blot analyses, and microarray analysis. The kits form
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