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- 2025年11月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
2×RealStar Green Fast Mixture UNG（with ROX）
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃恒温避光保存一年，避免反复冻融。如果经常使用，可置于4℃保存至少三个月。
- 规格：
1.1 ml/1.1 mlx 5/1.1 mlx 10
【产品概述】
本产品是在2×RealStar Green Fast Mixture基础之上，独特开发出的新型防污染荧光定量预混体系。产品含有优化浓度的 HotStart Taq DNA Polymerase、SYBR Green I、dATP、dUTP、dCTP、dGTP、UNG酶（尿嘧啶DNA糖基化酶）、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分。本品在PCR反应中以dUTP代替dTTP，扩增片段中的T部分被U取代，形成含dU碱基的PCR扩增产物，新添加的UNG酶可以降解反应体系中的含U的DNA，有效消除PCR产物的残留污染，大大降低扩增产物污染导致的假阳性，从而保证扩增的特异性和准确性。
本产品为2×防污染预混实时荧光定量快速PCR反应体系（含ROX），使用时只需加入模板、引物、ROX Reference Dye（用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差，根据不同荧光定量PCR仪选择使用）和水，使其工作浓度为1×，即可进行反应。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差、节约PCR实验操作时间、降低污染几率。
【产品组分】2×RealStar Green Fast Mixture UNG with ROX* 1.1 ml x 1支
*注：
需加ROXReference Dye (50×)的机型:ABI Prism7000/7300/7700/7900HT和ABI Step One /ABI Step One Plus。
需加ROXReference Dye II (50×)的机型:ABI Prism7500 /7500 Fast , MJ Research Chromo4,Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000。
无需加ROX Reference Dye的机型: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler System，Corbett Rotor-gene 6000, Agilent Technologies Mx3000P等荧光定量PCR仪。
【保存条件】
-20℃恒温避光保存一年，避免反复冻融。如果经常使用，可置于4℃保存至少三个月。
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文献和实验真香！用 qPCR 做外泌体研究，南京医科大学拿下 41 分 SCI
等）、miRNA 加尾法逆转录试剂盒做反转录：适用于短片段 RNA（主要为 miRNA）的加尾法。 4）qPCR 检测 采用 Umibio 2×SYBR Green qPCR 试剂：预混 ROX1 型适用于 ABI 5700 等设备、预混 ROX2 型适用于 ABI 7500 等设备。 5）数据分析：采用仪器自带的 QPCR 分析软件进行数据分析 可以看到 qPCR 检测外泌体可行且可靠，但实验过程并不简单，因此我们对经常会遇到的问题及解答也进行了整理，帮助大家更好的完成实验。 qPCR检测外泌常见问题及解决
Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手
设置（program setup）。我们以 ABI StepOne为例，详细看一下反应设置： A. 首先是实验目的选择：定量还是其他。我们命名为“BioTeke”，进行“定量”实验。 B. 实验方法的选择：我们选用的比较Ct的SYBR Green方法， Fast程序，以cDNA为模板进行。 C. 目的基因的设置：有几个目的基因和目的基因的名称
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用
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