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- 2025年11月21日
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文献和实验, 邓国仁, 吕有勇等. 变性高效液相色谱法检测CpG岛胞嘧啶甲基化 [J].中华医学杂志, 2001, 80(2), 158–1611.[22]Wu J, Issa J, Hermen J, et al. Expression of an exogenous eukaryotic DNA methyl transferase gene induces transformation of NIN3T3 ceils [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1993, 90(19
性结合，对DEAE膜上的荧光素进行扫描得到5mC的水平，其荧光素强度与5mC水平成正比。Oakeley等1997年[23]报道了这种方法。这种方法需要精密的仪器。 2.1.4 氯乙醛法 Oakeley等1999年[24]首先描述了这种使用氯乙醛和荧光标记的方法。首先，将DNA经重亚硫酸盐处理使未甲基化的胞嘧啶全部转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变（Frommer等1992年）[25]，然后经过银或色谱柱去除DNA链上的嘌呤，再将样品与氯乙醛共同孵育，这样5mC就转变为带有强荧光的乙烯胞嘧啶
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
验设计复杂，易产生假阴性或假阳性等问题，提示科学家寻找更加容易且准确的分析手段。 甲基化敏感性高分辨熔解分析（MS-HRM）是近年兴起的一种适用于评估特定基因DNA甲基化的新技术[4]。它基于当前实时荧光PCR仪器的前沿应用 – 高分辨率熔解曲线分析（HRM），使用既可扩增甲基化序列也可扩增非甲基化序列的引物对来自经重亚硫酸盐修饰的DNA的相关区进行PCR扩增。重亚硫酸盐修饰DNA，让非甲基化的胞嘧啶转换为尿嘧啶，而5－甲基胞嘧啶保持不变，随后通过PCR扩增检测感兴趣区域的甲基化状态。在MS-HRM中
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