- ¥1000
- ZKbscience
- ZK-0020435
- 中国/美国
- 2025年11月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 英文名：
pET-23(+)
- 保质期：
三年
- 供应商：
再康生物
- 保存条件：
常温
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3592bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物: | T7 |
| 5' 测序引物序列: | 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 载体标签: | C-His |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄 青 霉 素) |
| 备注: |
Designed for expression from bacterial translational signal within cloned insert (no ribosome binding site or ATG start codon).
|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| ZK1959 | pET-23(+) | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
pET-23(+) (Cat. No. 69771-3) is a transcription vector designed for expression from bacterial translation signals carried within a cloned insert. It therefore lacks the ribosome binding site and ATG start codon present on the pET translation vectors. A C-terminal His•Tag® sequence is available. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer (Cat. No. 69337-3).
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文献和实验加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α（+）载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α（+）载体骨架连接基因片段1小时，载体末端和插入末端的比例为1：3（fmol）。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21（DE3）在冰上混合10分钟，并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
相关专题 1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株，噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株，构建好的表达载体 可以直接转入表达菌株中，诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是IPTG诱导。 2)表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因，T7 RNA 聚合酶编码基因以及lacUV5启动子，lacUV5启动子可以启动T7 RNA 聚合酶的表达; 3)表达质粒 如pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏
！希望大家多讨论一下给我点经验和建议，谢谢大家啦！ kinguangjun 你好！要增加可溶性，可以换成为能增加可溶性表达的载体来试试，例如pGEX-4T-1或pET32a(+)等，如果还是不行，可能只能用真核表达系统啦！ woxingwosu kinguangjun wrote: 你好！要增加可溶性，可以换成为能增加可溶性表达的载体来试试，例如pGEX-4T-1或pET
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