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大量
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一年
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件:
-20°C
- 规格:
2×1ml
中文名:酵母tRNA溶液(5mg/ml),高纯
英文名:
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:-20°C
产品简介酵母tRNA是以粗品酵母tRNA为原料,经过纯化后,用分光光度计测定浓度纯度后定量稀释为5mg/mL浓度。
本产品可以用于微量RNA的提取和助沉剂使用,也可以应用于原位杂交,Northern杂交,对于探针为RNA的杂交实验尤其适用。
使用方法一:(作为核酸助沉剂使用)
1.乙醇沉淀法沉淀DNA或RNA。在核酸溶液中加入1/10体积的3M 乙酸钠(pH5.2),再加入2倍体积的无水乙醇。
2.再加入终浓度为20ug/mL的酵母tRNA溶液,震荡混匀后置于-20℃冰箱15min(时间可以延长或过夜)。
3.高速(12000-15000rmp/min)离心15min以上,小心吸弃上清。
4.75%乙醇洗涤沉淀,12000-15000rmp/min离心5min,小心吸弃上清。
5.略作干燥后溶解于TE或者DPEC水中。
注:由于 tRNA 是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的 DNA 或 RNA 要用于此类反应,就不能使用 tRNA 作为助沉剂。如果回收的 RNA 要用于 RT-PCR,使用 tRNA 可能会对反应的特异性产生干扰。
使用方法二:(作为杂交封堵剂使用)
本产品可以作为原位杂交、Northern 杂交和 RNA 斑点杂交的封堵剂,也可以作为 Southern 杂交和 DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为 100ug/mL。
如果使用 RNA 探针,最好使用本产品做封堵剂,以保护 RNA 探针。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验1.毕赤酵母表达常用溶液及缓冲液的配制1.1 各种母液的配制10*YNB:(含有硫酸铵、无氨基酸的13.4%酵母基础氮源培养基) 4℃保存。34g酵母基础氮源培养基(无硫酸铵)+100g硫酸铵,溶于1000ml水中,过滤除菌。500*B:(0.02%生物素 Biotin) 4℃保存 保存期为1年。20mg的生物素溶于100ml水中,过滤除菌。100*H:(0.4%Histidine 组氨酸) 4℃保存 保存期为1年。400mg的L-组氨酸溶于100ml水中,(加热至50℃以促进溶解),过滤
得到所需的蛋白质,为目前所常用的技术方法。 His-tag系统有很高的蛋白产量(5–40 mg/ml resin),但理想情况下的纯度约为80%左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能,就需要再进行更多的cleaning steps。 Strep-tag®系统一步纯化满足的纯度可达到95%,无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析。产量数据为16 mg/ml。 深度对比Strep-tag®与His-tag系统 His-tag是以6个组氨酸残基组合的融合标签,其基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链
系统,都使用了亲和层析法来纯化得到所需的蛋白质,为目前所常用的技术方法。 His-tag 系统又很高的蛋白产量(5~40 mg/mL resin),但理想情况下的纯度约为 80% 左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能,就需要再进行更多的 cleaning steps; Strep-tag® 系统一步纯化满足的纯度可达到 95%,无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析,产量数据为 16 mg/mL。 深度对比 Strep-tag® 与 His-tag His-tag
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