类器官专用基质胶

货号：MG2255

储存：-80℃ 保存，避免反复冻融。保质期2年

1. 产品简介

基质胶是从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤提取的可溶性细胞培养基质，含有丰富的细胞外基质蛋白，主要包括层粘连蛋白、胶原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生长因子。

基底胶在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。基质胶也适用于类器官生长、分化、代谢和毒理学研究。高浓度的基质胶可以用于动物体内成瘤实验的细胞包被。

本款基质胶针对类器官培养进行了特别优化，在总蛋白浓度不变的条件下，调整了层粘连蛋白和部分生长因子等组分的比例，提升了培养类器官的成功率和稳定性。         

2. 操作方法

2.1类器官培养方法

1. 用适量的4℃过夜解冻的基质胶重悬细胞或组织沉淀，推荐重悬密度为每 50μL基质胶悬液包含 1X10⁵细胞，重悬后可置于冰上，重悬时间不超过 30s 以避免基质胶过早凝固。基质胶稀释比例应在 70%以上以保证培养过程中基质胶的结构稳定性。

2. 将基质胶和组织细胞的混合悬液点入预热的24 孔板底部正中央，每孔 30μL 左右，避免悬液接触孔板侧壁。为防止基质胶室温凝固，此步骤应尽快完成。

3. 将接种完成后的培养板至于 37℃二氧化碳恒温培养箱中，孵育 15min 左右待基质胶凝固。

4. 待基质胶完全凝固后，沿壁缓慢加入类器官培养基，24 孔板每孔 500uL，避免破坏已凝固结构。

5.将 24 孔板置于 37℃二氧化碳培养箱中培养。

6.每 3 天更换一次培养基，更换培养基时应避免破坏基质胶。

2.2 胚胎干细胞 ES 和诱导多能干细胞 ips cell培养

1. 在冰上解融一份分装的基质胶。

2. 在50 mL离心管中加入24 mL的预冷的DMEM/F-12，并且放在冰上。

3. 将解融的基质胶按一定比例（如1:100）加入到预冷的 DMEM/F-12中（在50 mL离心管中），混匀。

4. 稀释好的基质胶溶液必须立即使用，进行培养皿的包被。推荐的包被体积参见下表。

培养皿	稀释后的基质体积
6孔培养板	1 mL/孔
10 mm培养皿	6 mL/培养皿
T-25培养瓶	3 mL/培养瓶
T-75培养瓶	8 mL/培养瓶

5. 轻轻晃动培养皿，将基质胶溶液均匀的覆盖到培养皿的表面。

注意：如果培养皿的表面没有被基质胶溶液完全覆盖，则不能用于人ES和iPS细胞培养。

6. 培养皿使用前至少在室温(15 - 25°C)孵育1个小时，不可使基质胶蒸发。

  

注意事项：

1.收到产品并确认到货情况无异常后，请将基质胶储存于--80℃冰箱，短暂使用可置于-20℃冰箱。切勿将基质胶储存于自动除霜的冰箱中。在第一次融化后请分装保存，应避免基质胶反复冻融。

2.因基质胶在 10℃以上即可成胶，在操作过程中，保持基质胶一直置于冰上，所有接触的细胞培养器皿，移液吸头，分装管等都必须预冷后使用。

3.所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用 70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证基质胶呈匀浆状。

4.溶解时可将基质胶基质置于 4℃冰箱内冰上过夜溶解。成胶后基质胶可以在 4℃ 24－48 小时后重新呈液态。