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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100+
- 检测范围:
1.57-100 ng/mL
- 检测方法:
Sandwich
- 灵敏度:
0.54 ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1960.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2800.0 |
人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)酶联免疫吸附检测试剂盒适合聚焦免疫调控、炎症应答与标志物研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,用于定量检测样本中 NAP 水平变化,帮助开展分组比较、表达差异分析与机制验证。核心优势是采用 Sandwich ELISA 方案,单次实验约 3.5 小时、每孔样本量 100 μL,兼顾常规批量检测效率与结果对比需求。适用样本包括 血清、血浆、组织匀浆及其他生物液体,检测范围 1.57-100 ng/mL,灵敏度 0.54 ng/mL。
基础信息
| 英文名称 | Human NAP(Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit |
|---|---|
| 相关别称 | LAP; Leukocyte Alkaline Phosphatase |
| 货号 | ELK4631 |
| 品牌 | ELK Biotechnology 科鹿生物 |
| 规格 | 48T / 96T |
| 检测方法 | Sandwich |
| 适用样本 | 血清、血浆、组织匀浆及其他生物液体 |
| 检测范围 | 1.57-100 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.54 ng/mL |
| 标准品 | 100 ng/mL |
| 研究领域 | 酶&激酶、肿瘤免疫、感染免疫学、血液学 |
试剂盒组成
| 组分 | 48T | 96T | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| 酶标板(可拆)(Pre-coated Microplate) | 6 条 × 8 孔 | 12 条 × 8 孔 | 4°C/-20°C |
| 冻干标准品(Standard (lyophilized)) | 1 | 2 | 4°C/-20°C |
| 标准品&样品稀释液(Standard/Sample Diluent Buffer) | 10 mL | 20 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩生物素化抗体(100×)(Biotinylated Antibody (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4°C/-20°C |
| 生物素化抗体稀释液(Biotinylated Antibody Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩HRP酶结合物(100×)(Streptavidin-HRP (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4°C/-20°C |
| 酶结合物稀释液(HRP Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩洗涤液(25×)(Wash Buffer (25×)) | 10 mL | 20 mL | 4°C/-20°C |
| 显色底物溶液(TMB)(TMB Substrate Solution) | 6 mL | 10 mL | 4°C/-20°C(避光) |
| 反应终止液(Stop Reagent) | 3 mL | 6 mL | 4°C/-20°C |
| 封板覆膜(Plate Covers) | 1 | 2 | 常温 |
| 产品说明书(Instruction Manual) | 1份 | 1份 | 常温 |
保存条件
试剂盒拆封后可 4°C 保存 1 周,如果 1 周内未用完,请将剩余酶标板,冻干标准品,浓缩生物素化抗体,浓缩 HRP 酶结合物放置在-20°C 保存,其他试剂4°C 保存,并在6 个月内用完。
若试剂盒未拆封:4°C(短时间存放,6 个月内有效);-20°C(长时间存放,1 年内有效);避免反复冻融,过期后请勿使用。
如果试剂盒整盒保存在-20°C,请在实验前一天晚上将试剂盒放置在4°C。
操作流程
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|
检测原理
人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)酶联免疫吸附检测试剂盒采用夹心法原理。将特异性抗人 NAP抗体包被于96孔微孔板中,向微孔中分别加入人 NAP标准品或样本,使标准品中的人 NAP蛋白或样本中的人 NAP蛋白与固相于微孔板上的抗人 NAP抗体结合,然后加入生物素化抗人 NAP抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记链亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人 NAP蛋白呈正相关。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值),通过绘制标准曲线计算出样品浓度。
性能验证数据
标准曲线
| Concentration (ng/mL) | OD | Corrected OD |
|---|---|---|
| 100.00 | 2.201 | 2.118 |
| 50.00 | 1.586 | 1.503 |
| 25.00 | 1.143 | 1.060 |
| 12.50 | 0.780 | 0.697 |
| 6.25 | 0.539 | 0.456 |
| 3.13 | 0.365 | 0.282 |
| 1.57 | 0.165 | 0.082 |
| 0.00 | 0.083 | 0.000 |

精密度
板内精密度(测定内的精密度): CV% < 8%
三个已知浓度的样品分别在1个酶标板上测试20次,以评估分析板内精密度。
板间精密度(测定板间间精密度): CV% < 10%
三个已知浓度的样品分别在3个不同的酶标板上测试40次,以评估分析板间的精密度。
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的人 NAP, 做回收率实验,得出回收率范围和平均回收率
| 样本类型 | 回收率范围 | 平均回收率 |
|---|---|---|
| 血清(n=5) | 87-99% | 93% |
| EDTA 血浆(n=5) | 90-103% | 96% |
| Heparin 血浆(n=5) | 78-93% | 85% |
线性
将添加有人 NAP的样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围
| 样本类型 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
|---|---|---|---|---|
| 血清(n=5) | 88-95% | 98-107% | 90-99% | 88-97% |
| EDTA 血浆(n=5) | 83-95% | 88-102% | 85-97% | 80-92% |
| Heparin 血浆(n=5) | 98-107% | 93-102% | 80-93% | 91-100% |
常见问题
Q:这款 NAP ELISA 试剂盒更适合哪些研究场景?
A:人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)酶联免疫吸附检测试剂盒聚焦免疫调控、炎症应答与标志物研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,可用于样本中 NAP 的定量比较、分组筛查和机制验证。结合其适用样本 血清、血浆、组织匀浆及其他生物液体,适合常规科研检测和阶段性课题验证。
Q:48T 和 96T 规格应该怎么选,更适合哪种采购场景?
A:如果当前以预实验、小批量验证或样本量较少的项目为主,可优先选择 48T;如果需要进行多批次分组比较、重复孔较多或计划连续检测,48T / 96T 中的 96T 规格更适合提高通量并减少补货频率。
Q:如果暂时不确定样本浓度,这款试剂盒是否仍然适合使用?
A:可以先结合本产品 1.57-100 ng/mL 的检测范围和 0.54 ng/mL 的灵敏度进行预判断。若样本可能高于上限,建议先做梯度稀释后上样;若目标属于低丰度表达,这款试剂盒也适合做前期筛查和分组定量。
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文献和实验人体有多种细胞内含有一种叫做碱性磷酸酶的物质。血细胞内也含有这种物质,但多数不表现出活性,即处于“沉睡”状态,只有中性粒细胞的成熟阶段表现出碱性磷酸酶活性,我们称之为中性粒细胞碱性磷酸酶(简称N—ALP)。中性粒细胞碱性磷酸酶存在于成熟中性粒细胞的胞浆内,可以通过钙—钴方法使之着色来显示。然后计算出反应的阳性率和积分,即可表示中性粒细胞碱性磷酸酶活性的高低。计算方法:显微镜下观察100个成熟中性粒细胞,有阳性反应的细胞数即阳性率;再按下列标准评分,将每个细胞的积分相加,即得出积分
中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)是一种胞内水解酶。测定其活性对于某些血液病的诊断、鉴别诊断和疗效观察有重要价值。目前国内推荐的改良Gomori钙钴法(简称改良法),其孵育时间长达4 h,试剂配制繁琐,我们将生物化学中有关磷酸基受体缓冲液的原理应用于NAP染色,即在改良法的基础上,以2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)为缓冲体系,建立一种简便快速染色法(简称快速法),孵育时间只需15 min,报道如下。 一、材料与方法
(3)中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP):成熟中性粒细胞的NAP活性明显降低,甚至消失。 (4)特异性和非特异性酯酶染色:氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色呈阳性反应。醋酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D-NAE)可呈阳性反应,但强度较弱,且不被氟化钠抑制。 (5)Phi(ф)小体染色:原始和幼稚粒细胞内出现Phi(ф)小体医|学教育网搜集整理。 (6)染色体及分子生物学检验:特异性染色体重排t(6;9)约见于1%的AML,主要为本型。 4.免疫学检验:表达髓系抗原,可有原始细胞和干细
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