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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100+
- 检测范围:
0.16-10 ng/mL
- 检测方法:
Sandwich
- 灵敏度:
0.066 ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥2240.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥3200.0 |
采用 Sandwich ELISA 方案,适用样本为血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体。
人琥珀酸脱氢酶复合体D亚基(SDHD)酶联免疫吸附检测试剂盒适合聚焦相关蛋白定量、分组比较与机制验证研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,用于定量检测样本中 SDHD 水平变化,帮助开展分组比较、表达差异分析与机制验证。
核心优势是采用 Sandwich ELISA 方案,单次实验约 3.5 小时、每孔样本量 100 μL,兼顾常规批量检测效率与结果对比需求。
适用样本包括 血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体,检测范围 0.16-10 ng/mL,灵敏度 0.066 ng/mL。
| 英文名称 | Human SDHD(Succinate Dehydrogenase Complex Subunit D) ELISA Kit |
|---|---|
| 相关别称 | PGL; PGL1; QPs3; Succinate-ubiquinone reductase membrane anchor subunit; Succinate dehydrogenase [ubiquinone] cytochrome b small subunit, mitochondrial |
| 货号 | ELK0127 |
| 品牌 | ELK Biotechnology 科鹿生物 |
| 规格 | 48T / 96T |
| 检测方法 | Sandwich |
| 适用样本 | 血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体 |
| 检测范围 | 0.16-10 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.066 ng/mL |
| 标准品 | 10 ng/mL |
| 研究领域 | 酶&激酶 |
| 组分 | 48T | 96T | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| 酶标板(可拆)(Pre-coated Microplate) | 6 条 × 8 孔 | 12 条 × 8 孔 | 4℃ / -20℃ |
| 冻干标准品(Standard (lyophilized)) | 1 | 2 | 4℃ / -20℃ |
| 标准品&样品稀释液(Standard/Sample Diluent Buffer) | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩生物素化抗体(100×)(Biotinylated Antibody (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 生物素化抗体稀释液(Biotinylated Antibody Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩HRP 酶结合物(100×)(Streptavidin-HRP (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 酶结合物稀释液(HRP Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩洗涤液(25×)(Wash Buffer (25×)) | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 显色底物溶液(TMB)(TMB Substrate Solution) | 6 mL | 10 mL | 4℃ / -20℃(避光) |
| 反应终止液(Stop Reagent) | 3 mL | 6 mL | 4℃ / -20℃ |
| 封板覆膜(Plate Covers) | 1 | 2 | 常温 |
| 产品说明书(Instruction Manual) | 1 份 | 1 份 | 常温 |

- 试剂盒和样本室温平衡后,每孔加入标准工作缓冲液100 μL(按说明书梯度稀释)或样品100 μL, 37℃孵育80 分钟。
- 弃去酶标板中液体,每孔加入200 μL洗涤缓冲液,洗涤3 次。 拍干后,每孔加入100 μL 生物素化抗体工作液,37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板中液体,每孔加入200 μL洗涤缓冲液,洗涤3 次。拍干后,每孔加入100 μL HRP 酶工作液,37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板内液体,每孔加入200 μL洗涤缓冲液,洗涤5 次。拍干后, 每孔加入90 μL TMB, 37℃孵育20 min。
- 每孔加入50 μL终止液,450 nm 立即读数,计算结果。
人琥珀酸脱氢酶复合体D亚基(SDHD)酶联免疫吸附检测试剂盒采用夹心法原理。将特异性抗人 SDHD 抗体包被于96孔微孔板中,向微孔中分别加入人 SDHD 标准品或样本,使标准品中的人 SDHD 蛋白或样本中的人 SDHD 蛋白与固相于微孔板上的抗人 SDHD 抗体结合,然后加入生物素化抗人 SDHD 抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP 标记链亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB 底物显色。TMB 在过氧化物酶催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人 SDHD 蛋白呈正相关。用酶标仪在450 nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过绘制标准曲线计算出样品浓度。
标准曲线
| Concentration (ng/mL) | OD | Corrected OD |
|---|---|---|
| 10.00 | 2.082 | 1.995 |
| 5.00 | 1.647 | 1.560 |
| 2.50 | 1.186 | 1.099 |
| 1.25 | 0.752 | 0.665 |
| 0.63 | 0.532 | 0.445 |
| 0.32 | 0.356 | 0.269 |
| 0.16 | 0.179 | 0.092 |
| 0.00 | 0.087 | 0.000 |

精密度
板内精密度(测定内的精密度): CV% < 8%
三个已知浓度的样品分别在1个酶标板上测试20 次,以评估分析板内精密度。
板间精密度(测定板间间精密度): CV% < 10%
三个已知浓度的样品分别在3个不同的酶标板上测试40 次,以评估分析板间的精密度。
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的人 SDHD, 做回收率实验,得出回收率范围和平均回收率
| 样本类型 | 回收率范围 | 平均回收率 |
|---|---|---|
| 血清(n=5) | 80-95% | 87% |
| EDTA 血浆(n=5) | 86-99% | 92% |
| Heparin 血浆(n=5) | 82-97% | 89% |
线性
将添加有人 SDHD的样本分别稀释2 倍,4 倍,8 倍,16 倍做回收实验,得出回收率范围
| 样本类型 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
|---|---|---|---|---|
| 血清(n=5) | 88-97% | 96-103% | 86-92% | 89-97% |
| EDTA 血浆(n=5) | 88-96% | 86-95% | 90-103% | 87-90% |
| Heparin 血浆(n=5) | 87-94% | 85-96% | 92-102% | 81-90% |
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文献和实验酶联免疫吸附实验(ELISA)BIOX.CN 2004-9-7 14:41:36来源:生命经纬基本原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体
一、基本原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标
的有色物质,而是发光产物,所发出的光可用特定的仪器测定。常用HRP和AP作为标记酶与其发光底物作用进行分析。 4、增强发光酶免疫分析 增强发光酶免疫分析(enhaned luminescene enzyme immunoassay, ELEIA)是EIA技术的新发展。其特点是酶促增强发光信号,并稳定和延长发光信号时间。既保持发光免疫分析的高灵敏度,又克服了传统发光酶免疫分析所发信号时间短的缺点,目前国外已实现自动化分析。 5、BAS-酶联免疫吸附试验 BAS-酶联免疫吸附试验是将生物素-亲和
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