- ￥2240 - 3200
- ELK Biotechnology 科鹿生物
- 0.16-10 ng/mL
- 0.051 ng/mL
- ELK0125
- 2026年06月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100+
- 检测范围：
0.16-10 ng/mL
- 检测方法：
Sandwich
- 灵敏度：
0.051 ng/mL
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥2240.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥3200.0 |
采用 Sandwich ELISA 方案，适用样本为血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体。
人氢/钾离子交换ATP 酶β肽（ATP4b）酶联免疫吸附检测试剂盒适合聚焦信号传导、分子机制与差异表达研究的实验室，尤其适合组织样本相关定量验证，用于定量检测样本中 ATP4b 水平变化，帮助开展分组比较、表达差异分析与机制验证。
核心优势是采用 Sandwich ELISA 方案，单次实验约 3.5 小时、每孔样本量 100 μL，兼顾常规批量检测效率与结果对比需求。
适用样本包括 血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体，检测范围 0.16-10 ng/mL，灵敏度 0.051 ng/mL。
| 英文名称 | Human ATP4b（ATPase, H+/K+ Exchanging Beta Polypeptide） ELISA Kit |
|---|---|
| 相关别称 | Proton pump beta chain; Gastric H（+）/K（+） ATPase subunit beta |
| 货号 | ELK0125 |
| 品牌 | ELK Biotechnology 科鹿生物 |
| 规格 | 48T / 96T |
| 检测方法 | Sandwich |
| 适用样本 | 血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体 |
| 检测范围 | 0.16-10 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.051 ng/mL |
| 标准品 | 10 ng/mL |
| Uniprot ID | P51164 |
| 研究领域 | 信号传导 |
| 组分 | 48T | 96T | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| 酶标板（可拆）（Pre-coated Microplate） | 6 条 × 8 孔 | 12 条 × 8 孔 | 4℃ / -20℃ |
| 冻干标准品（Standard (lyophilized)） | 1 | 2 | 4℃ / -20℃ |
| 标准品&样品稀释液（Standard/Sample Diluent Buffer） | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩生物素化抗体（100×）（Biotinylated Antibody (100×)） | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 生物素化抗体稀释液（Biotinylated Antibody Diluent） | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩HRP 酶结合物（100×）（Streptavidin-HRP (100×)） | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 酶结合物稀释液（HRP Diluent） | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩洗涤液（25×）（Wash Buffer (25×)） | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 显色底物溶液（TMB）（TMB Substrate Solution） | 6 mL | 10 mL | 4℃ / -20℃(避光） |
| 反应终止液（Stop Reagent） | 3 mL | 6 mL | 4℃ / -20℃ |
| 封板覆膜（Plate Covers） | 1 | 2 | 常温 |
| 产品说明书（Instruction Manual） | 1 份 | 1 份 | 常温 |
- 试剂盒和样本室温平衡后，每孔加入标准工作缓冲液100 μL（按说明书梯度稀释）或样品100 μL, 37℃孵育80 分钟。
- 弃去酶标板中液体，每孔加入200 μL洗涤缓冲液，洗涤3 次。 拍干后，每孔加入100 μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板中液体，每孔加入200 μL洗涤缓冲液，洗涤3 次。拍干后，每孔加入100 μL HRP 酶工作液，37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板内液体，每孔加入200 μL洗涤缓冲液，洗涤5 次。拍干后， 每孔加入90 μL TMB, 37℃孵育20 min。
- 每孔加入50 μL终止液，450 nm 立即读数，计算结果。
人氢/钾离子交换ATP 酶β肽（ATP4b）酶联免疫吸附检测试剂盒采用夹心法原理。将特异性抗人 ATP4b 抗体包被于96孔微孔板中，向微孔中分别加入人 ATP4b 标准品或样本，使标准品中的人 ATP4b 蛋白或样本中的人 ATP4b 蛋白与固相于微孔板上的抗人 ATP4b 抗体结合，然后加入生物素化抗人 ATP4b 抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP 标记链亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB 底物显色。TMB 在过氧化物酶催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人 ATP4b 蛋白呈正相关。用酶标仪在450 nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过绘制标准曲线计算出样品浓度。
标准曲线
| Concentration (ng/mL) | OD | Corrected OD |
|---|---|---|
| 10.00 | 2.166 | 2.072 |
| 5.00 | 1.790 | 1.696 |
| 2.50 | 1.239 | 1.145 |
| 1.25 | 0.782 | 0.688 |
| 0.63 | 0.562 | 0.468 |
| 0.32 | 0.361 | 0.267 |
| 0.16 | 0.192 | 0.098 |
| 0.00 | 0.094 | 0.000 |
精密度
板内精密度（测定内的精密度）： CV% < 8%
三个已知浓度的样品分别在1个酶标板上测试20 次，以评估分析板内精密度。
板间精密度（测定板间间精密度）： CV% < 10%
三个已知浓度的样品分别在3个不同的酶标板上测试40 次，以评估分析板间的精密度。
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的人 ATP4b， 做回收率实验，得出回收率范围和平均回收率
| 样本类型 | 回收率范围 | 平均回收率 |
|---|---|---|
| 血清（n=5） | 87-95% | 90% |
| EDTA 血浆（n=5） | 80-95% | 87% |
| Heparin 血浆（n=5） | 84-102% | 93% |
线性
将添加有人 ATP4b的样本分别稀释2 倍，4 倍，8 倍，16 倍做回收实验，得出回收率范围
| 样本类型 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
|---|---|---|---|---|
| 血清（n=5） | 85-100% | 80-97% | 81-92% | 87-103% |
| EDTA 血浆（n=5） | 87-98% | 92-104% | 82-96% | 95-102% |
| Heparin 血浆（n=5） | 88-101% | 93-106% | 85-95% | 92-104% |
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文献和实验的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相EIA在临床检验中较少应用。非均相EIA需先进行游离的和结合的标记物的分离。如前所述，固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶免疫测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay），简称ELISA，在国内有译作酶联免疫吸附试验或酶标，已习用。2、ELISA的原理和类型2.1. ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫
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