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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant IRS1 Protein (C-Term) with His-tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
20 µg/100 µg/1000 µg
| 规格: | 20 µg | 产品价格: | ¥2380.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100 µg | 产品价格: | ¥8180.0 |
| 规格: | 1000 µg | 产品价格: | ¥40680.0 |
蛋白名称:IRS1 Protein (C-Term) with His-tag
蛋白构建:Recombinant human IRS1 (600-1242) was expressed by baculovirus in Sf9 insect cells using an C-terminal His tag.
表达宿主:Baculovirus-Insect Cells
蛋白纯度:For specific information on a given lot, see related technical data sheet.
蛋白活性:For specific information on a given lot, see related technical data sheet.
蛋白分子量:68
蛋白NP号:NM_005544600-1242
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文献和实验表达 • N端带有6×His标签,在Ni-NTA上进行一步亲和纯化, 利用TAGZyme™可去除6×His标签 • 可表达无标签蛋白,利用Nde I酶切,再连接去除His标签 • C端内置琥珀终止密码子,可利用EasyXpress Site-Specific Biotin Kit进行生物素标记 • 卡那霉素抗性用于筛选 图1 QIAgenes expression vector – E.coli QIAgenes表达载体有效提高蛋白表达量 说了这么多,还是通过实验数据来具体
His 标签蛋白纯化效果不理想,宝宝心里苦呀。今天,小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面: 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高,容易导致蛋白炭化;功率过低,蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率,同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素,如:金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时,优化缓冲液的pH、盐
填料 根据亲和层析的几种应用方向,亲和层析的填料主要分为标签蛋白纯化填料、抗体及抗体片段纯化填料、族特异性亲和填料以及预活化填料四种。 1. 标签蛋白纯化填料 为了简化纯化流程以及方便后期的检测,在进行重组蛋白表达时往往会加入标签。常用的标签包括His标签、GST标签、Strep标签及MBP标签等 (表8)。His标签由于分子量很小,几乎不会影响靶蛋白结构和功能而被广泛使用。GST和MBP标签常用于促进蛋白的可溶表达,尤其对于难表达的真核细胞蛋白和病毒蛋白有很好的促溶表达能力。Strep
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