流式细胞仪常规清洗液

流式实验指南 | 流式细胞仪正压与负压上样

流式细胞仪的样本进样设计核心在于正压与负压两种模式。负压上样利用真空吸力将样本吸入，结构简单但流速易受液位和粘度影响，适合常规定性分析。正压上样则通过气压将样本推入流动室，流速恒定精准，不仅支持绝对计数，还能温和处理脆弱细胞及微量珍贵样本。两者各有优劣，正压模式凭借高稳定性与低损伤特性，已成为高端定量检测的选择。   负压上样 这是传统流式细胞仪（如早期的BD FACSCalibur, Beckman Coulter EPICS等）最常用的方式。 工作原理：仪器内部的真空泵在流动室（Flow

小鼠外周血单细胞悬液制备流程及注意事项

小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血，加入 1 Test 对应流式抗体，混匀，4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液，混匀，4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min（裂解完立即离心，防止时间过长损伤细胞），弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞，用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项： 采血用抗凝管，有肝素和 EDTA 两种，若直接裂解

检测细胞增殖，你的方法用对了吗？

液：用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液（1000×）RPMI 1640 完全培养基：RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏，研磨成单细胞悬液，用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞，将细胞过 40 μm 细胞滤网后，进行细胞计数。样本清洗液洗涤（可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替），1 500 rpm 离心 5 min，用 PBS 重悬，调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE