流式细胞仪常规清洗液

小鼠外周血单细胞悬液制备流程及注意事项

小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血，加入 1 Test 对应流式抗体，混匀，4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液，混匀，4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min（裂解完立即离心，防止时间过长损伤细胞），弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞，用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项： 采血用抗凝管，有肝素和 EDTA 两种，若直接裂解

检测细胞增殖，你的方法用对了吗？

液：用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液（1000×）RPMI 1640 完全培养基：RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏，研磨成单细胞悬液，用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞，将细胞过 40 μm 细胞滤网后，进行细胞计数。样本清洗液洗涤（可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替），1 500 rpm 离心 5 min，用 PBS 重悬，调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE

一种罕见的血球仪故障处理探讨

进口试剂进行测试，果然PLT本底恢复正常，这样用进口清洗液试剂检测时发现的PLT本底偏高现象很可能就是该血凝决引起的。那为什么在此之前用生理盐水或国产试剂进行检测时．PLT本底值能在正常范围呢?笔者比较了国产清洗液试剂和进口清洗液试剂的配方，发现进口清洗液的配方为无水硫酸钠、氯化钠、杀菌剂、表面活性剂等；而国产试剂配方中少了无水硫酸钠，由此笔者分析，进口原装清洗液的清洗能力强于国产试剂，在对于一般情况的常规清洗，进口与国产试剂的清洗能力可能无明显差异，但是在对一些特殊情况，例如血凝块附着于管道