2×EZ4 高保真、长片段、快速 PCR 混合液 含染料

PCR专题

，因此不会影响含dU 的新的PCR 产物。 3）dU 引物法：合成引物时以dU 代dT，这样PCR 产物中仅5ˊ端带dU.UNG 处理后，引物失去了结合位点而不能扩增。对长片段（1-2kb 以上）的扩增用dUTP 法效率较用dTTP低，而用dU 法就可克服这一缺点。dU 引物最好将dU 设计在3ˊ端或近ˊ端。该法仅能用于引物以外试剂的处理。 4）优点：可以去除任何来源的污染；UNG 处理可以和PCR 扩增在同一个反应管内进行；由于扩增产物中有大量dU 存在，可彻底消除污染源。 5）需注意的是掺入

叶绿体的制备及其对染料的还原

                                ↓ H2O 氧化型染料（兰色）→→  O2 还原型染料（无色）   所以我们通过染料和离体叶绿体混合液在照明光前后，染料颜色上变化可以鉴别被分离的叶绿体的活力。   叶绿体是比较大的细胞器，在叶肉细胞中含量丰富，用新鲜的植物叶片匀浆后使用普通离心机进行离心也能得到良好的分离效果。   叶绿体酶系对热敏感，在室温下容易失活，因此，提取叶绿体

PCR技术综述

。 2、dUTP法：用dUTP代替dTTP，使产物中掺入大量dU。在再次进行PCR扩增前，用UNG处理PCR混合液即可消除PCR产物的残留污染。由于UNG在PCR循环中的变性一步便可被灭活，因此不会影响含dU的新的PCR产物。 3、dU引物法：合成引物时以dU 代dT，这样PCR产物中仅5ˊ端带dU。UNG处理后，引物失去了结合位点而不能扩增。对长片段（1-2kb以上）的扩增用dUTP法效率较用dTTP低，而用dU法就可克服这一缺点。dU引物最好将dU设计在3ˊ端或近ˊ端。该法仅能用于引物以外试剂的处理