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【求助】有关流式PI染色测量细胞周期

的时候出问题了 细胞估计已经破裂 固定时候应该缓慢添加固定液 有的时候固定液就是用PBS和无水乙醇配置的。 Fasta921 我做的步骤：接种适当浓度细胞于培养皿中，培养过夜后，经0.25%胰蛋白酶消化,冷磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后离心,用70%(体积分数)预冷乙醇悬浮细胞于-20度固定过夜后,离心收集细胞,用PBS洗3次去除乙醇,细胞团重悬于PBS中,用20 μg/ml含RNaseA的碘化丙啶PI染色液避光染色30 min,经100目尼龙网

正常小鼠前脂肪细胞的培养

µg/ml、转铁蛋白10µg/ml、成纤维细胞生长因子（FGF）10ng/ml和高密度脂蛋白（HDL）溶液5µl/ml； 7. 高密度脂蛋白（HDL）溶液：含蛋白质18mg/ml和胆固醇10mg/ml； 8. 地塞米松：工作浓度为10-7 mol/L； 9. 筛网：孔径分别为250µm与80µm的尼龙网筛； 实验方法： 1. 取材； ① 取8—12天龄的小鼠，窒息处死后，置于冰块上； ② 在无菌条件下迅速切取腹股沟的脂肪垫，放入PBS液中； ③ 清除脂肪垫中的大血管和结缔

AUTOMACS系统自动分选体系分选小鼠CD4+ CD25+抑制性细胞

PE磁珠 9. 完全RPMI培养基 10. 小鼠CD3+ T细胞富集柱和1×纯化柱缓冲液 11. 15ml离心管，无菌 12. autoMACS系统和分选柱 13. 30mm尼龙网或40mm预分离滤膜 实验方法： 1. 用20只小鼠的淋巴结制备单细胞悬液并去除红细胞。 2. 将细胞在20mlHBSS洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数