EGF-FGF 双因子外泌体

产品简介: 

品牌：Umibio/宇玫博  

货号：UR53217 

产品名称：EGF-FGF 双因子外泌体 

产品规格：100 μg  

产品描述：过表达 FGF-EGF 的 293T 培液中分离 包装体积： 100 uL，低温（-40—80℃) 保 存干冰运输 

品牌介绍: 

  宇玫博生物专业从事于外泌体产品开发和技术服务的高科技公司。2015年成立于上海张江高科技园区，是国内最早开展外泌体研究、服务及相关试剂开发的专业公司，现已发展为专业化外泌体药物递送和试剂方案的供应商。 业务范围包括：新型药物载体的研发、外泌体规模化提纯和生产、外泌体诊断试剂研发、外泌体相关产品的销售等，核心技术解决了外泌体规模化提纯、外泌体药物递送、外泌体标记等技术难点。 

 

 

研究背景：

 

雄激素性脱发（Androgenetic alopecia，AGA）是全球最常见的脱发类型，特征是毛囊微型化和生长周期紊乱。目前一线治疗药物（米诺地尔、非那雄胺）存在疗效有限、副作用明显、停药后易复发等问题。表皮生长因子（EGF）和成纤维细胞生长因子（FGF）是调控毛囊再生的关键生长因子，但在AGA患者的毛囊中表达显著下调。研究表明，EGF/FGF用于AGA的治疗需要高效的靶向递送和持续维持有效局部浓度。外泌体作为纳米级信使参与细胞间通信，因其天然的药物装载能力、低免疫原性和微环境调节特性，是优秀的递送系统。本研究旨在研究双因子工程化外泌体（EXO-EGF/FGF）对小鼠的雄激素性脱发的治疗作用机制，为AGA治疗提供一些参考。

研究成果及意义：

 

在本研究中，作者首先对3例AGA患者和3例HC患者头皮组织的毛囊细胞进行单细胞RNA测序，结果显示AGA 患者毛囊髓质、皮质等部位NOTCH通路基因显著下调（P<0.05）。免疫荧光、Western Blot 和免疫组化实验进一步验证得出AGA 患者毛囊中EGF和FGF蛋白表达显著降低（P<0.05），证实生长因子缺乏是AGA的重要病理特征。为了实现EGF和FGF向毛囊的靶向递送，作者在293T细胞中通过LAMP2B融合工程构建了过表达EGF和FGF的工程外泌体（EXO-EGF/FGF）并进行了鉴定。TEM显示典型的茶托型双层膜囊泡结构；  NTA显示粒径约98nm，浓度为2.69×10¹¹ particles/mL；Zeta电位分析表明 EXO-EGF/FGF 具有中等稳定性；SDS-PAGE和Western Blot证实EXO-EGF/FGF中EGF和FGF特异性富集，表达水平显著高于天然外泌体。为了评估潜在细胞毒性，作者使用DHT诱导的HFDPCs建立了AGA细胞模型，用浓度梯度的EXO-EGF/FGF（0–320 μg/mL）处理AGA细胞模型24小时后，CCK-8实验结果显示EXO-EGF/FGF无细胞毒性并促进细胞增殖，160μg/mL浓度促增殖效果最佳。为了研究EXO-EGF/FGF治疗AGA的作用机制，作者用睾酮丙 酸处理HFDPCs 24小时，建立了AGA细胞模型。流式细胞术分析结果发现EXO-EGF/FGF显著促进G1/S期转换，S期细胞比例从18.9%增至34.2%，表明EXO-EGF/FGF通过促进G1/S相变，有效重编程HFDPCs的细胞周期，从而推动细胞增殖。Ki67免疫荧光染色显示Ki67阳性细胞比例从3.4%升至47.4%，细胞划痕实验显示48小时迁移率达65.6%，显著高于模型组的35.8%。这些结果表明，EXO-EGF/FGF在AGA模型中有效促进了细胞增殖、迁移和细胞周期进展。为了评估EXO-EGF/FGF的治疗效果，作者建立了睾酮诱导的AGA小鼠模型。结果发现，EXO-EGF/FGF治疗使毛发覆盖率从21.5%恢复至58.4%，HE染色显示毛囊从休止期微型化状态恢复至生长期形态，免疫组化证实Ki67、EGF、FGF表达显著上调。这些结果证实，EXO-EGF/FGF通过逆转雄激素驱动的增殖和生长因子抑制，促进头发再生，从而使AGA中的病理性毛发周期正常化。在AGA小鼠皮下注射12天EXO-EGF/FGF后，作者评估了其生物安全性。结果发现心、肝、脾、肺、肾等主要器官结果完整，HE染色组织病理学结果显示不存在病理病变，没有观察到坏死、炎症浸润或纤维化改变；血常规（血红蛋白、白细胞、血小板）和肝肾功能指标（ALT、AST、BUN、肌酐）保持在正常生理范围，无免疫原性反应和全身毒性。这些发现综合表明，EXO-EGF/FGF具有良好的生物安全特征，并展现出AGA治疗的转化潜力。

综上所述，作者成功构建了LAMP2B介导的EGF/FGF双因子工程化外泌体（EXO-EGF/FGF），能有效递送EGF和FGF至毛囊微环境，修复AGA病理状态。该策略克服了传统生长因子疗法稳定性差、靶向性弱的缺陷，显著促进毛囊再生。该工程化外泌体在体外和体内均能有效修复AGA病理微环境，促进毛囊再生，具有良好的生物安全性和临床转化潜力，为AGA治疗提供了新的思路和平台技术。

外泌体鉴定相关数据：

上海市皮肤病医院/同济大学医学院丁晓峰教授，上海东方医院/同济大学医学院刘中民教授为论文的共同通讯作者。上海市皮肤病医院赖永贤教授和吴俊超博士为论文共同第一作者。该工作还得到了上海宇玫博生物科技有限公司创始人高博士的大力支持。