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γδT细胞介绍
γδT细胞是T淋巴细胞中一个独特且功能强大的亚群,因表面T细胞受体(TCR)由γ链和δ链组成而得名。它仅占外周血T淋巴细胞的1%-10%,却在免疫系统中扮演着不可替代的角色。γδT细胞在肿瘤免疫监视、组织稳态维持和感染防御中发挥关键作用。人体中主要分为两大功能亚群:Vδ2细胞主要存在于外周血,是血液中的主要亚群;Vδ1细胞则富集于肠道、皮肤等黏膜组织。凭借独特的MHC非依赖性识别机制和强大的广谱抗肿瘤活性,γδT细胞已成为下一代肿瘤免疫治疗和细胞治疗药物研发的热点方向。
华辰生物 γδT细胞激活扩扩增试剂盒介绍
华辰生物(HUACHEN Bio)作为细胞治疗领域解决方案的领军企业,开发了两种基于novaT-36培养基和pureSep-γδT纯化试剂的临床级γδT细胞高效激活扩增先进方法,为该领域的临床应用提供了创新性的全流程解决方案。
hyperClone Human γδT Activation/Expansion Cocktail Kit
以新鲜/冻存PBMC为起始细胞,通过pureSep-γδT纯化试剂(αβT去除试剂)从全血中高效快速去除αβT细胞轻松得到纯化的γδT细胞,采用唑来膦 酸激活法(第一代)和纯因子激活法(第二代),获得高增殖、高纯度、杀伤性强的γδT细胞。华辰提供的两种扩增方法各有侧重,为不同研究需求提供了灵活选择。
第一代γδT细胞试剂盒:唑来膦 酸激活法
无需预先纯化,激活过程加入唑来膦 酸,扩增Vδ2细胞和部分Vδ1细胞,总细胞数可扩增100-300倍,可以扩大培养体积实现细胞数量放大。D14天细胞纯度超过90%,杀伤活性高。第一代试剂盒适用于新鲜或冻存的细胞。
γδT细胞培养照片

细胞培养数据

流式细胞仪检测

第二代 γδT细胞试剂盒:纯因子方案
pureSep-γδT纯化试剂从全血中高效快速去除αβT细胞,通过密度梯度负选原理实现高纯度γδT细胞富集,为γδ T细胞的超高纯度扩增奠定基础。同时扩增Vδ2细胞和部分Vδ1细胞,同时保持高纯度和功能完整性。全程纯因子配方,无需引入化学试剂刺激,培养至d7纯度超过90%,d14纯度超过98%,非常适合大规模异体γδT细胞临床应用。
培养前的γδT细胞的富集,确保了不同供者间稳定的扩增效果,有效解决了原代细胞扩增中常见的供者个体差异性问题,为研究的可重复性提供了有利保障。
第二代kit因为引入了pureSep-γδT纯化试剂,适用于新鲜的外周血。
novaT-36培养基是扩增的关键支撑,它经过特殊配制,无血清无动物源,化学成分明确,是临床级应用的优选方案。该培养基能同时支持Vδ2细胞和Vδ1细胞亚群的生长,确保扩增细胞的高纯度和功能完整性。
γδT细胞培养照片

细胞培养数据


流式结果

γδT细胞培养至D14与K562共孵育20h进行肿瘤杀伤试验

γδT细胞异体现货产品大规模制备工艺流程

WAVE阶段细胞生长总数

WAVE培养阶段,细胞生长总数呈指数增长,细胞生长旺盛;50mL外周血起始,采用2.5L灌流培养体系,wave培养5天获得超600亿细胞。
WAVE阶段细胞扩增倍数

WAVE培养阶段,细胞扩增倍数由初始的150倍飙升至3345倍;远超平面理论培养的2880倍,有极大的培养优势。
反应器细胞培养实景实拍

流式结果

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文献和实验降低二次感染新冠的风险,减轻可能感染后产生的症状的严重程度。 图2 新冠疾病中抗原特异性T细胞体外扩增及应用 货号 产品名称 作用 CT-006 细胞毒性T细胞高效扩增试剂盒 体外培养获得大量高纯度细胞毒性T细胞 CT-014 细胞毒性T细胞高效扩增试剂盒(增强版) 体外培养获得大量高纯度细胞毒性T细胞 CT-016 抗原特异性T细胞高效扩增试剂盒(SARS-COV-2)
αβT细胞的攻击。 相比之下,γδT细胞是固有免疫系统中的效应细胞,这些细胞以MHC不受限制的方式发挥作用,使它们成为癌症免疫治疗的理想介质。最近的研究表明,γδT细胞对各种类型的癌细胞具有强大的细胞毒性作用。然而,γδT细胞仅占循环淋巴细胞的一小部分,临床效益并不令人满意。目前,如何在体外获得数量充足且功能强大的γδT细胞正在成为研究的热点,一些改进方法,如双特异性抗体和CAR-γδT可能突破γδT细胞的局限性,提高抗肿瘤效果。 γδT细胞的激活 人类外周血γδT细胞主要表达Vδ2链
【进展|热点】Immunity:γδT细胞产IL-17与自身TCR无关
IL-17在机体抵抗病原体入侵方面发挥着重要作用,其最重要的生物学功能在于能募集中性粒细胞到病原体感染(炎症)部位,促进病原体的消除。Th17细胞是IL-17的主要来源,一般认为,入侵病原体被抗原递呈细胞(特别是树突状细胞)表面的模式识别受体识别,促进DC分化成熟,合成并释放各种细胞因子;同时将通过抗原-MHC分子复合体的形式激活初始Th细胞,促进Th细胞的分化。在微环境IL-6、TGFβ以及IL-21的自分泌作用下,促进初始Th细胞IL-23受体以及转录因子RORγt的表达的,促进初始Th细胞
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