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- 免疫组化-病理学检测-免疫组化技术
- 江苏省常州市
- 2025年11月21日
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免疫组化-病理学检测-免疫组化技术
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张
免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）基于免疫学中的抗原-抗体特异性结合原理。其技术流程为：
1.一抗结合：组织切片或细胞样本中的目标抗原首先与特异性一抗结合。
2.二抗标记：一抗再与标记生物素或荧光素的二抗结合。
3.信号放大：标记生物素的二抗进一步与链霉亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等酶标复合物结合，形成级联放大系统。
4.信号显色：最终通过酶促显色反应（如DAB底物）或荧光信号，实现抗原在组织及细胞内的定位（空间分布）、定性（是否存在）及定量（表达水平）分析
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文献和实验）等。以IHC为例，其本质为HRP标记的特异性抗体在组织细胞原位的抗原抗体反应和组织化学的显色反应，检测原理如下图： 图 3 免疫组化染色原理图 随着分子医学、个性化医学和靶向性治疗的发展与进步，免疫组化病理检测技术以其高度的特异性和准确性、形态与功能相结合等特点，在临床病理诊断中凸显出极大的优势，为诊断医学开辟了崭新局面，被誉为病理学的「棕色革命」。其应用也越来越广泛，逐步从病理诊断的辅助技术转变为临床病理诊断主要的独立的技术手段之一。与其他病理诊断技术形成良好互补关系，为临床病理诊断分子靶向治疗，疾病
案例一：DAB染色后切片着色一片黄/背景深 背景：奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验，许多从北京购买的试剂买不到，对我们的许多实验产生了很大的影响。 我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒，效果不错，在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验，第一批组化实验结果很好，抗体浓度感觉比较合适（Santa Cruz公司1：200），等做第二批时发现封闭血清不够了，为了保证实验顺利进行，我又从福州迈新顶了一个SP试剂盒，同时抗体稀释液也不够了，我又重新从博士
免疫组织化学染色是研究组织形态和组织原位抗原表达不可或缺的检测技术，但随着精准化治疗的进展和蛋白组学研究的深入，传统的免疫组化单染因具有一定的局限性，在某些方面已无法满足需求，而免疫组化多重染色可以在同一张组织切片上对多种抗原蛋白进行共定位和共表达，这对于理解组织微环境中各种细胞间的关系，推演信号通路上下游蛋白表达的关系，制定临床诊断和治疗方案都有着非常重要的意义。 本次讲座内容主要包括两大部分，一是介绍免疫组化酶双染的原理、方法以及实战案例；二是免疫组化多重荧光染色的原理、方法并结合案例
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