- ￥2000
- 免疫共沉淀Co-IP实验（蛋白互作）
- 江苏省常州市
- 2025年11月21日
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
江苏知源解码
- 服务名称：
Co-IP实验
- 规格：
组
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）技术解析
1. 原理简介
免疫共沉淀（Co-IP）是一种基于抗原-抗体特异性结合的经典技术，用于在生理条件下捕获并分析蛋白质相互作用。其核心机制是：当细胞在非变性条件下裂解时，细胞内天然存在的蛋白质互作网络得以保留；通过靶蛋白（如蛋白A）的特异性抗体，结合固化于琼脂糖微珠（agarose beads）上的蛋白A/G，可将靶蛋白及其在体内直接或间接结合的互作蛋白（如蛋白B）共同沉淀，形成“靶蛋白-抗体-微珠”复合物。后续通过Western blot等技术对沉淀复合物中的互作蛋白进行鉴定，可验证蛋白质相互作用的真实性。
2. 技术优势
天然互作状态保留：捕获的蛋白质复合物经翻译后修饰并维持天然构象，真实反映细胞内生理性相互作用，避免体外人为干扰。
结果可靠性高：互作蛋白与靶蛋白的结合发生于活细胞内，支持后续功能研究与机制解析。
复合物完整性：可分离完整的蛋白质复合物，适用于质谱等高通量互作蛋白筛选。
3. 实验流程
1.样本制备：提取细胞或组织总蛋白，采用温和裂解缓冲液（如含NP-40的RIPA缓冲液）保留蛋白质互作结构，添加蛋白酶抑制剂防止降解。
2.免疫沉淀：
裂解液与靶蛋白抗体共孵育过夜（4℃），形成抗原-抗体复合物；
加入蛋白A/G微珠捕获复合物，洗涤去除非特异性结合蛋白。
3.互作蛋白检测：
变性洗脱复合物，通过SDS-PAGE分离蛋白质；
Western blot检测互作蛋白（如蛋白B）的表达。
4.结果记录：化学发光成像系统采集蛋白条带，分析靶蛋白与互作蛋白的共沉淀信号。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验了一线技术支持常被问到的问题，希望这篇纯干货能帮助大家顺利升级打怪，早日驾驭 IP、co-IP。 IP、co-IP、pull-down 简介 IP（Immunoprecipitation），免疫沉淀：是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法 Co-IP（co-Immunoprecipitation），免疫共沉淀： co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法，其基本实验流程和IP类似，通过使用诱饵蛋白（IP 中的抗原，bait protein）特异
—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime)，细胞刮，4 度离心机（eppendorf，centrifuge
原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体，孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠，若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N，就可以形成这样一种复合物：“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”，经 SDS
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
